产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
S0535S | 支链氨基酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 | 998.00元 |
碧云天研发的支链氨基酸检测试剂盒(WST-8法) (Branched Chain Amino Acid Assay Kit with WST-8 or BCAA Assay Kit with WST-8),是一种基于WST-8显色反应,通过比色法,快速、高灵敏地对血清、血浆和尿液等生物体液、组织和细胞裂解液以及细胞培养上清样品中支链氨基酸的含量进行检测的试剂盒。
支链氨基酸(Branched-chain amino acid, BCAA)是蛋白质中常见的、侧链具有分支的亮氨酸、缬氨酸和异亮氨酸这三种氨基酸的统称。支链氨基酸包含的这三种氨基酸都是人体的必需氨基酸,其中亮氨酸是蛋白质中含量最丰富的氨基酸,也是饮食中蛋白质代谢或组织中蛋白质分解的主要产物。支链氨基酸占肌肉蛋白质中必需氨基酸的35%,占哺乳动物必需氨基酸的40%[1]。支链氨基酸不仅是蛋白质的合成原料,还具有特殊的生物学功能,也可作为生物体的能量来源,在医药、食品及饲料等领域中也有广泛的用途[2]。
支链氨基酸具有多种代谢和生理作用。代谢方面,支链氨基酸可以参与蛋白质的合成、信号转导和葡萄糖代谢等。生理学方面,支链氨基酸在免疫系统和神经系统中发挥作重要作用。支链氨基酸通过免疫细胞表达的脱氢酶和脱羧酶被有效分解,并且是淋巴细胞生长、增殖和细胞毒性T淋巴细胞活动必需的物质。支链氨基酸与芳香族氨基酸共同进入大脑的相同转运蛋白,在蛋白质合成、神经递质合成和能量代谢中发挥作用。作为人体必需氨基酸,支链氨基酸不能在人体内合成,但它们可被一些酶催化发生分解代谢。许多作用于这些支链氨基酸的酶可以利用这三种氨基酸作为底物,从而调节这三种支链氨基酸的水平。支链氨基酸中有一种氨基酸水平发生变化,则另外两个氨基酸通常也会出现相同方向性和量级水平的变化[3]。
本试剂盒的检测原理如图1所示。支链氨基酸在支链氨基酸脱氢酶(Leucine Dehydrogenase, Isoleucine Dehydrogenase and Valine Dehydrogenase, Leu/Ile/Val Dehydrogenase)的作用下氧化生成α-酮异己酸(α-Ketoisocaproate, KIC),在这一反应过程中NAD+被还原为NADH;生成的NADH在电子耦合试剂1-mPMS (1-Methoxy-5-methylphenazinium methyl sulfate)的作用下将WST-8还原生成橙黄色的Formazan,在450nm左右有最大吸收峰。反应体系中生成的Formazan与样品中支链氨基酸的含量成正比。
图1.碧云天支链氨基酸检测试剂盒(WST-8法) (S0535)检测原理图。
本试剂盒检测灵敏度高,线性范围宽,样品用量少。本试剂盒在样品体积为20µl时可以检测浓度低至20μM的支链氨基酸,在20μM-2000μM (0.4-40nmol)浓度范围内有良好的线性关系。本试剂盒提供了亮氨酸标准溶液,可以通过设置标准曲线(图2),从而计算出样品中的支链氨基酸含量。
图2.碧云天支链氨基酸检测试剂盒(WST-8法) (S0535)检测亮氨酸标准品的标准曲线。本试剂盒测定亮氨酸标准品,在20-2000μM浓度范围内有良好的线性关系。实际检测数据会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
本试剂盒提供的检测裂解液有一定的通用性。使用本试剂盒中的BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay裂解获得的细胞或组织样品,也可以用于碧云天生产的其它代谢类试剂盒中同样使用BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay进行裂解的样品检测,通用性强;,而且还可用于检测蛋白浓度、进行SDS-PAGE或一些较易溶解蛋白的Western检测。
本试剂盒使用灵活,检测速度快,适用范围广。本试剂盒可用于小鼠、大鼠、人等的血清、血浆、尿液等生物体液,细胞培养上清、组织或细胞样品等的检测,全程约0.5-1小时即可完成。本试剂盒不仅适合少量样本的检测,也非常适合高通量筛选(High-throughput screening)的自动化操作系统。
按照使用说明操作,用于96孔板检测时,本试剂盒小包装可以进行100次检测。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
S0535S-1 | BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay | 20ml |
S0535S-2 | 支链氨基酸检测缓冲液 | 20ml |
S0535S-3 | 酶溶液 | 200μl |
S0535S-4 | 显色液 | 200μl |
S0535S-5 | 底物 | 200μl |
S0535S-6 | 亮氨酸标准溶液(50mM) | 200μl |
- | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存,一年有效。其中显色液和底物须避光保存。
注意事项:BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay、支链氨基酸检测缓冲液(后续简称检测缓冲液)、显色液和底物需要完全解冻并平衡至室温后再使用,否则会影响检测结果。酶溶液和亮氨酸标准溶液使用时应在冰上进行。
底物从-20ºC取出在融解过程中可能会有析出,平衡至室温后析出的部分会复溶,不会对检测结果产生影响。
血清等样品如在4ºC保存,保存时间不得超过2周,否则会影响检测结果的准确性。通常血清样品宜-20ºC保存,-80ºC保存更佳。
为减少稀释液产生的背景带来的误差,样品和标准品的稀释液应该根据样品的种类来定。当样品为BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay制备的细胞或组织的裂解样品时,应使用BeyoLysis™ Buffer A for Metabolic Assay稀释,当样品为血液等其它样品时,宜使用检测缓冲液稀释。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Samples | 1 | 10 | 20 | 50 |
BCAA Assay Buffer (μl) | 74 | 740 | 1480 | 3700 |
Enzyme Solution (μl) | 2 | 20 | 40 | 100 |
Chromogen Solution (μl) | 2 | 20 | 40 | 100 |
Substrate (μl) | 2 | 20 | 40 | 100 |
Working Solution (μl) | 80 | 800 | 1600 | 4000 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
C0016/C0017 | 乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒 | 100次/500次 |
C0018S/M | 乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(WST-8法) | 100次/500次 |
S0110S | 黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0111S | 黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0112S/M | Amplex Red黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒 | 100次/500次 |
S0113S | Amplex Red黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒 | 100次 |
S0114S | 黄嘌呤/次黄嘌呤检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0204S | D-乳酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0208S | L-乳酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0211S/M | Amplex Red胆固醇与胆固醇酯检测试剂盒 | 100次/500次 |
S0215S/M | Amplex Red游离脂肪酸检测试剂盒 | 100次/500次 |
S0219S/M | Amplex Red甘油三酯检测试剂盒 | 100次/500次 |
S0223S/M | Amplex Red甘油检测试剂盒 | 100次/500次 |
S0227S | Amplex Red L-乳酸检测试剂盒 | 100次 |
S0231S | Amplex Red尿酸与尿酸酶检测试剂盒 | 100次 |
S0235S | Amplex Red磷酸盐检测试剂盒 | 100次 |
S0239S | Amplex Red乙醇检测试剂盒 | 100次 |
S0243S/M | Amplex Red黄嘌呤/次黄嘌呤检测试剂盒 | 100次/500次 |
S0247S | Amplex Red谷氨酸与谷氨酸氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
S0251S | Amplex Red过氧化氢与过氧化物酶检测试剂盒 | 100次 |
S0255S | Amplex Red过氧化氢酶检测试剂盒 | 100次 |
S0259S | Amplex Red单胺氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
S0263S | Amplex Red鞘磷脂酶检测试剂盒 | 100次 |
S0267S | Amplex Red胆碱与乙酰胆碱检测试剂盒 | 100次 |
S0271S | Amplex Red乙酰胆碱酯酶检测试剂盒 | 100次 |
S0275S | Amplex Red磷脂酰胆碱检测试剂盒 | 100次 |
S0279S | Amplex Red磷脂酶D检测试剂盒 | 100次 |
S0283S | Amplex Red肌酸检测试剂盒 | 100次 |
S0287S | Amplex Red肌酸激酶检测试剂盒 | 100次 |
S0291S | Amplex Red肌酐检测试剂盒 | 100次 |
S0295S | Amplex Red肌氨酸检测试剂盒 | 100次 |
S0299S | Amplex Red丙酮酸检测试剂盒 | 100次 |
S0303S | Amplex Red丙酮酸激酶检测试剂盒 | 100次 |
S0307S | Amplex Red ADP检测试剂盒 | 100次 |
S0311S | Amplex Red磷酸烯醇式丙酮酸检测试剂盒 | 100次 |
S0315S | Amplex Red丙氨酸检测试剂盒 | 100次 |
S0319S | Amplex Red丙氨酸转氨酶检测试剂盒 | 100次 |
S0323S | Amplex Red α-酮戊二酸检测试剂盒 | 100次 |
S0327S | Amplex Red天冬氨酸检测试剂盒 | 100次 |
S0331S | Amplex Red天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒 | 100次 |
S0335S | Amplex Red柠檬酸检测试剂盒 | 100次 |
S0339S | Amplex Red草酰乙酸检测试剂盒 | 100次 |
S0343S | Amplex Red葡萄糖检测试剂盒 | 100次 |
S0347S | Amplex Red葡萄糖氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
S0351S | Amplex Red果糖检测试剂盒 | 100次 |
S0355S | Amplex Red乳糖检测试剂盒 | 100次 |
S0359S | Amplex Red半乳糖与乳糖检测试剂盒 | 100次 |
S0363S | Amplex Red半乳糖与半乳糖氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
S0367S | Amplex Red麦芽糖检测试剂盒 | 100次 |
S0371S | Amplex Red麦芽糖与葡萄糖检测试剂盒 | 100次 |
S0375S | Amplex Red糖原检测试剂盒 | 100次 |
S0379S | Amplex Red磷酸果糖激酶检测试剂盒 | 100次 |
S0383S | Amplex Red乙酰辅酶A检测试剂盒 | 100次 |
S0387S | Amplex Red辅酶A检测试剂盒 | 100次 |
S0391S | Amplex Red乙酰辅酶A合成酶检测试剂盒 | 100次 |
S0511S | L-苹果酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0514S | 苹果酸脱氢酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0517S | 延胡索酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0520S | 延胡索酸酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0523S | 异柠檬酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0526S | 异柠檬酸脱氢酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0529S | Amplex Red琥珀酸检测试剂盒 | 100次 |
S0530S | 琥珀酸脱氢酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0532S | Amplex Red琥珀酰辅酶A合成酶检测试剂盒 | 100次 |
S0535S | 支链氨基酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0538S | N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0540S | 酪氨酸检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0542S | 酪氨酸酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0545S | 酪氨酸酶抑制剂筛选试剂盒(显色法) | 100次 |
S0547S | 髓过氧化物酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0548S | Amplex Red髓过氧化物酶活性检测试剂盒 | 100次 |
S0550S | Amplex Red髓过氧化物酶抑制剂筛选试剂盒 | 100次 |