产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
S0113S | Amplex Red黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒 | 100次 | 658.00元 |
碧云天研发的Amplex Red黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒,即Amplex Red Xanthine Oxidase Inhibitor Screening Kit,也称Amplex Red XO Inhibitor Screening Kit或Amplex Red XOD Inhibitor Screening Kit,是一种基于探针Amplex Red利用荧光检测,简单、快速、灵敏地用于黄嘌呤氧化酶抑制剂高通量筛选的试剂盒。
黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase, XO or XOD)是体内核酸代谢中的一种重要酶,可以催化次黄嘌呤氧化为黄嘌呤,并能进一步催化黄嘌呤氧化为尿酸,同时产生过氧化氢以及超氧化物阴离子的一系列氧化反应,在包括人类在内的一些物种中的嘌呤分解代谢中起着重要作用[1]。在人类及其它灵长类动物中,XO通常存在于血清、肺、肝脏和肠黏膜中。在啮齿类动物中,XO在大部分组织中均有表达。血液中XO的活性通常都很低。当感染甲型流感时,血清及肺部的XO活性会增加[2]。当肝功能受损时,XO会大量释放到血液中,因此检测血液中XO水平被作为一个评估严重肝损伤(例如黄疸)的灵敏指标[3]。XO也可能与痛风的发病机理相关,黄嘌呤氧化酶是尿酸形成的代谢途径,因此使用黄嘌呤氧化酶抑制剂别嘌呤醇用于治疗痛风。此外,研究显示抑制XO活性可缓解心血管疾病及慢性阻塞性肺疾病[4,5]。
本试剂盒的检测原理请参考图1。黄嘌呤(Xanthine)在黄嘌呤氧化酶的催化作用下和氧气发生氧化反应生成尿酸(Uric acid)和H2O2。本试剂盒提供的XO Probe是一种对H2O2高度敏感的荧光探针,在辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase, HRP)存在的情况下,XO Probe能与H2O2 1:1反应,产生强烈的红色荧光物质试卤灵(Resorufin)。试卤灵的最大激发波长为571nm,最大发射波长为585nm,荧光强度与黄嘌呤氧化酶催化产生的H2O2的量成正比。如果在反应中加入黄嘌呤氧化酶抑制剂(Inhibitor),黄嘌呤氧化酶的活性会被抑制,导致H2O2的生成量减少,进而抑制荧光的生成,荧光强度与抑制剂的抑制效果成反比,这样就可以检测出抑制剂的抑制效果。
图1.碧云天Amplex Red黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒(S0113)的原理图。
本试剂盒含抑制剂阳性对照,使用便捷。本试剂盒提供XO检测缓冲液(XO Assay Buffer)、黄嘌呤氧化酶(XO)、XO底物(XO Substrate)、阳性对照非布司他(Febuxostat)及可以催化产生荧光需要的探针(XO Probe)和辣根过氧化物酶(HRP)。阳性对照Febuxostat是一种选择性的非嘌呤类XO抑制剂,临床上常用于痛风及高尿酸血症的治疗。通常Febuxostat的IC50约为2nM-20nM。使用本试剂盒检测Febuxostat的效果请参考图2。
图2.碧云天Amplex Red黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒(S0113)检测Febuxostat的效果图。图中Febuxostat的IC50约为5nm。实测结果可能会因样品和检测条件等的不同而存在差异,图中数据仅作参考。
本试剂盒检测速度快,检测灵敏度高。相较于黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒(WST-8法) (S0111),本试剂盒在检测效率和灵敏度上有更进一步的提升,整个检测过程约15分钟即可完成。本试剂盒中XO和XO Substrate等的使用量进行了优化,不仅能检测出IC50很低的抑制剂,也能检测出IC50较高的抑制剂。
碧云天同时提供基于WST--8法的黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒(S0111)。
按照使用说明操作,用于96孔板检测时,本试剂盒的小包装可以进行100次检测。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
S0113S-1 | XO Assay Buffer | 30ml |
S0113S-2 | XO Probe | 600μl |
S0113S-3 | XO (20X) | 30μl |
S0113S-4 | HRP (20X) | 30μl |
S0113S-5 | XO Substrate (10X) | 60μl |
S0113S-6 | Febuxostat (10μM) | 20μl |
— | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存,一年有效。XO Probe和HRP须避光保存。
注意事项:XO Probe在空气中不太稳定,开启后应尽快使用,且在使用过程中要注意适当避光。
XO Probe的反应产物在还原剂的存在下会很不稳定,样品中带入到最终反应体系中的二硫苏糖醇(DTT)或者β-巯基乙醇的浓度须低于10μM。
请确保样品的pH值在7-8之间,或者确保加入样品后反应体系的pH值在7-8之间,否则会影响XO Probe的稳定性和荧光值。
XO Assay Buffer和XO Probe需要完全解冻并平衡至室温后再使用,否则会影响检测结果。XO和HRP使用时应在冰上进行。使用完毕后各试剂应立即按照试剂盒保存的条件进行保存。
待测抑制剂的溶剂可能会对检测产生干扰,推荐以XO Assay Buffer、Milli-Q级纯水(ST872)、DMSO (ST038)为溶剂配制、稀释待测抑制剂,并在对照孔中添加与抑制剂等体积的溶剂以排除干扰。如果使用其它溶剂请确保在最终的反应体系中溶剂浓度不应超过5%,如超过5%,请同时设置溶剂对照组以测试溶剂对酶活性的影响,排除干扰。
XO、HRP、XO Substrate等试剂的量均比较少,在使用前请先适当离心,然后适当混匀后再使用。
荧光检测时建议使用96孔黑板(FCP965/FCP966)。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Blank Control | 100% Activity Control | Inhibitor Control | Sample Group | |
XO Assay Buffer | 80µl | 75µl | 75µl | 75µl |
XO (1X) | - | 5µl | 5µl | 5µl |
Sample Solvent* | 5µl | 5µl | - | - |
Febuxostat Solution | - | - | 5µl | - |
Test Inhibitors | - | - | - | 5µl |
37ºC, for 10 minutes |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
C0016/C0017 | 乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒 | 100次/500次 |
C0018 | 乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(WST-8法) | 100次/500次 |
S0110S | 黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0111S | 黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0112S | Amplex Red黄嘌呤氧化酶活性检测试剂盒 | 100次 |
S0113S | Amplex Red黄嘌呤氧化酶抑制剂筛选试剂盒 | 100次 |
S0114S | 黄嘌呤/次黄嘌呤检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0204S | D-乳酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0208S | L-乳酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0211S | Amplex Red胆固醇与胆固醇酯检测试剂盒 | 100次 |
S0215S | Amplex Red游离脂肪酸检测试剂盒 | 100次 |
S0219S | Amplex Red甘油三酯检测试剂盒 | 100次 |
S0223S | Amplex Red甘油检测试剂盒 | 100次 |
S0227S | Amplex Red乳酸检测试剂盒 | 100次 |
S0231S | Amplex Red尿酸与尿酸酶检测试剂盒 | 100次 |
S0235S | Amplex Red磷酸盐检测试剂盒 | 100次 |
S0239S | Amplex Red乙醇检测试剂盒 | 100次 |
S0243S | Amplex Red黄嘌呤/次黄嘌呤检测试剂盒 | 100次 |
S0247S | Amplex Red谷氨酸与谷氨酸氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
S0251S | Amplex Red过氧化氢与过氧化物酶检测试剂盒 | 100次 |
S0255S | Amplex Red过氧化氢酶检测试剂盒 | 100次 |
S0259S | Amplex Red单胺氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
S0263S | Amplex Red鞘磷脂酶检测试剂盒 | 100次 |
S0267S | Amplex Red胆碱与乙酰胆碱检测试剂盒 | 100次 |
S0271S | Amplex Red乙酰胆碱酯酶检测试剂盒 | 100次 |
S0275S | Amplex Red磷脂酰胆碱检测试剂盒 | 100次 |
S0279S | Amplex Red磷脂酶D检测试剂盒 | 100次 |
S0283S | Amplex Red肌酸检测试剂盒 | 100次 |
S0287S | Amplex Red肌酸激酶检测试剂盒 | 100次 |
S0291S | Amplex Red肌酸酐检测试剂盒 | 100次 |
S0295S | Amplex Red肌酸氨检测试剂盒 | 100次 |
S0299S | Amplex Red丙酮酸检测试剂盒 | 100次 |
S0303S | Amplex Red丙酮酸激酶检测试剂盒 | 100次 |
S0307S | Amplex Red ADP检测试剂盒 | 100次 |
S0311S | Amplex Red磷酸烯醇式丙酮酸检测试剂盒 | 100次 |
S0315S | Amplex Red丙氨酸检测试剂盒 | 100次 |
S0319S | Amplex Red丙氨酸转氨酶检测试剂盒 | 100次 |
S0323S | Amplex Red α-酮戊二酸检测试剂盒 | 100次 |
S0327S | Amplex Red天冬氨酸检测试剂盒 | 100次 |
S0331S | Amplex Red天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒 | 100次 |
S0335S | Amplex Red柠檬酸检测试剂盒 | 100次 |
S0339S | Amplex Red草酰乙酸检测试剂盒 | 100次 |
S0343S | Amplex Red葡萄糖检测试剂盒 | 100次 |
S0347S | Amplex Red葡萄糖氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
S0351S | Amplex Red果糖检测试剂盒 | 100次 |
S0355S | Amplex Red乳糖检测试剂盒 | 100次 |
S0359S | Amplex Red半乳糖与乳糖检测试剂盒 | 100次 |
S0363S | Amplex Red半乳糖与半乳糖氧化酶检测试剂盒 | 100次 |
S0367S | Amplex Red麦芽糖检测试剂盒 | 100次 |
S0371S | Amplex Red麦芽糖与葡萄糖检测试剂盒 | 100次 |
S0375S | Amplex Red糖原检测试剂盒 | 100次 |
S0379S | Amplex Red磷酸果糖激酶检测试剂盒 | 100次 |
S0383S | Amplex Red乙酰辅酶A检测试剂盒 | 100次 |
S0387S | Amplex Red辅酶A检测试剂盒 | 100次 |
S0391S | Amplex Red乙酰辅酶A合成酶检测试剂盒 | 100次 |
S0511S | L-苹果酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0514S | 苹果酸脱氢酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0517S | 延胡索酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0520S | 延胡索酸酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0523S | 异柠檬酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0526S | 异柠檬酸脱氢酶活性检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0529S | Amplex Red琥珀酸检测试剂盒 | 100次 |
S0530S | 琥珀酸脱氢酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0532S | Amplex Red琥珀酰辅酶A合成酶检测试剂盒 | 100次 |
S0535S | 支链氨基酸检测试剂盒(WST-8法) | 100次 |
S0538S | N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0540S | 酪氨酸检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0542S | 酪氨酸酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0545S | 酪氨酸酶抑制剂筛选试剂盒(显色法) | 100次 |
S0547S | 髓过氧化物酶活性检测试剂盒(显色法) | 100次 |
S0548S | Amplex Red髓过氧化物酶活性检测试剂盒 | 100次 |
S0550S | Amplex Red髓过氧化物酶抑制剂筛选试剂盒 | 100次 |