碧云天的免冰浴Western超快速转膜液(10X)，即Ice-Bath Free Western Superquick Transfer Buffer (10X)，也称常温Western超快速转膜液、Room Temperature Western Superquick Transfer Buffer，是一种10倍浓缩的无需冰浴、转膜快速、安全无毒害的用于Western湿法转膜的缓冲液。使用本转膜液，仅需400mA转膜12分钟或500mA转膜10分钟，就可以实现270kD条带的完全转膜，对于待检测的目的蛋白分子量不是特别大的情况，仅需转膜更短的时间。

本产品使用方便、产热量少、无需冰浴。使用本产品进行转膜时，无需任何冰浴措施，包括转膜液预冷、内置冰盒及外置冰浴处理等，室温下即可将蛋白高效转移到印迹膜上，不影响转膜效果。在环境温度为25ºC或以下时，转膜15分钟后转膜液的温度通常仅升高5-10ºC，产热量少。

本产品转膜效果与需加冰浴的快速转膜液基本一致，且可进一步缩短转膜时间。本产品与碧云天需加冰浴的Western快速转膜液(10X) (P0572)转膜效果比较参考图1。

图1.碧云天的免冰浴Western超快速转膜液(P0573/P0576)与需加冰浴的Western快速转膜液(10X) (P0572)在转膜前后的对比效果图。上一行为使用本产品转膜15分钟的效果图，下一行为使用加冰浴的快速转膜液转膜25分钟的效果图。转移电极芯组件中放置两个转移三明治夹进行转膜。使用本产品转膜时为室温条件、无任何冰浴措施；使用需加冰浴的快速转膜液时，转膜液提前预冷且转膜时使用内置冰盒进行降温处理。凝胶为BeyoGel™ Elite PAGE预制胶(Bis-Tris, 4-15%, 10孔) (P0856)，凝胶厚度为1.0mm；蛋白分子量标准分别为彩色预染蛋白质分子量标准(10-180kD) (P0068)和BeyoColor™彩色预染蛋白分子量标准(6.5-270kD) (P0072)，每组重复两次上样，上样量为5μl；PVDF膜为PVDF膜(进口分装, 6.6×8.5cm, 0.45μm) (FFP32)；转膜设备为MiniBlot™蛋白转膜系统(E6050)；转膜电源为BeyoPower™高电流电源(300V/2000mA/200W) (E6085)。实际转膜效果会因实验条件、仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

本产品Western检测效果与需加冰浴的快速转膜液基本一致。本产品与碧云天需加冰浴的Western快速转膜液(10X) (P0572)对于大分子量目的蛋白(ZO-1、β-Catenin)和小分子量目的蛋白(GAPDH、Histone H3)的Westen检测效果比较请参考图2。

图2.碧云天的免冰浴Western超快速转膜液(P0573/P0576)与需加冰浴的Western快速转膜液(10X) (P0572)对于不同分子量目的蛋白的Western检测效果比较图。左图为使用本产品转膜15分钟的Western检测效果图，右图为使用加冰浴的快速转膜液转膜25分钟的Western检测效果图。蛋白样品为HEK293T细胞裂解液，上样量分别为15、10、7.5、5和2.5µl，裂解液浓度为2.7mg/ml；抗体分别为ZO-1 Rabbit Polyclonal Antibody (AF8394)、β-Catenin Mouse Monoclonal Antibody (AF0069)、GAPDH Mouse Monoclonal Antibody (AF2819)、Histone H3 Mouse Monoclonal Antibody (AF0009)。凝胶为BeyoGel™ Elite PAGE预制胶(Bis-Tris, 4-15%, 15孔) (P0857)，凝胶厚度为1.0mm。其它电泳和转膜条件和图1完全相同。图中可见对于大分子量的蛋白，本产品的转膜效果优于Western快速转膜液(10X) (P0572)，但对于小分子量的Histone H3略差于Western快速转膜液(10X) (P0572)，但实测如果转膜时间缩短至10分钟或5分钟，本产品的效果相近或更优。实际Western效果会因实验条件、仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

本产品转膜快速。使用本产品时，室温下400mA恒流12分钟或500mA恒流10分钟即可把270kD的蛋白分子量标准完全转移至印迹膜上。相同条件下使用其它公司同类免冰浴快速转膜液需转膜更长时间，转膜效果比较参考图3。

图3.碧云天的免冰浴Western超快速转膜液(P0573/P0576)与其它同类免冰浴快速转膜液在转膜前后的对比效果图。上图为使用本产品的效果图，下图为使用其它同类免冰浴快速转膜液的效果图，转膜时均为室温条件、无任何冰浴措施。其它电泳和转膜条件和图1完全相同。实际转膜效果会因实验条件、仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

本产品安全无毒害。本产品为10倍浓缩(10X)的储存液，仅需用适量蒸馏水和乙醇稀释至1X即可使用，不含任何有毒有害组分，也无需使用剧毒的甲醇等试剂[1]。

本产品适用范围广。本产品不仅适合手工配制的Tris-Gly和Hepes等缓冲系统的SDS-PAGE凝胶的转膜，也适合Tris-Gly、Hepes和Bis-Tris等电泳缓冲系统的预制胶的转膜。

4ºC保存，一年有效。室温保存，至少一周内有效。

如果转膜液颜色变成浅棕色或黄褐色，应该丢弃。

长时间在4ºC存放，如果出现沉淀，可以在水浴温育并充分溶解后再使用。

建议使用分析纯或更高纯度的乙醇。

使用本产品转膜时，如果设定恒流为400mA，无论是同一个转膜槽中1或2块胶转膜，电压在开始时通常为120V左右。由于转膜过程中，转膜液温度会逐渐升高，电阻变小，所以结束时电压通常为100V。转膜效率和电场强度(electric field strength，用E表示)以及蛋白所带的电荷相关，而电场强度主要和电压及电极之间的距离相关，即E=U/d。

由于用于转膜的电源品牌和型号的不同，一方面最高电流差异较大，另一方面功率也会有较大差别。通常大功率的电源相对贵一些，也更适合用于转膜。例如Bio-Rad Powerpac Basic Power Supply的最大功率是75W，在设定恒流为400mA时，电压超过187V时就会超过电源的最大功率而出现过载保护。有些电源会自动降低电压或电流，有些则会报错并停止转膜。对于出现停止转膜的情况，需要调低电流或电压，或者选择功率更大的电源。强烈推荐使用碧云天的BeyoPower™高电流电源(300V/2000mA/200W) (E6085)或BeyoPower™中电流电源(300V/600mA/100W) (E6080)用于Western等的转膜。

转膜时转膜液的温度、凝胶的参数(如数量、厚度、离子浓度、丙烯酰胺浓度等)、滤纸的厚度、同时使用的转膜槽数量、转膜液的离子浓度、转膜液的体积、转膜液使用的次数等都可能会影响电流和电压。如果需要同时使用2个或以上的转膜槽，建议使用高电流的大功率电源。

转膜时，如果出现报错而停止，需要根据情况查看是否是电压或电流过载，或者是如转膜液过多或过少、转膜槽的短路或断路等异常情况。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。