产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
D7023S | Taq DNA Ligase | 2KU | 298.00元 |
D7023M | Taq DNA Ligase | 10KU | 1158.00元 |
D7023L | Taq DNA Ligase | 40KU | 3698.00元 |
碧云天生产的Taq DNA Ligase,即Taq DNA连接酶,是由碧云天自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得的一种热稳定的以NAD (烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)为辅助因子的缺刻DNA连接酶。Taq DNA ligase能够有效催化与同一互补DNA链完全配对结合并且没有gap的两条相邻单链DNA的5'-磷酸和3'-羟基之间连接形成磷酸二酯键[1-3]。Taq DNA ligase基于其特性常被用于检测单碱基的变异,例如单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism, SNP)检测。
Taq DNA Ligase具有良好的热稳定性,在37-75ºC范围内均有活性[1-3]。
碧云天生产的Taq DNA Ligase用于连接BstEII酶切后的λDNA的效果参考图1。
图1.碧云天生产的Taq DNA Ligase用于连接BstEII酶切后的λDNA的效果图。使用本产品或N公司(Competitor)的Taq DNA Ligase,在20µl反应体系(20mM Tris-HCl, 25mM Potassium Acetate, 10mM Magnesium Acetate, 1mM NAD, 10mM DTT, 0.1% Triton X-100 (pH7.6 @25ºC))中,加入200ng经BstEII酶切的λDNA,再加入2µl的10X Reaction Buffer以及图中指定量的本产品或N公司(Competitor)的Taq DNA Ligase,然后用超纯水(ST873)补至20µl,45ºC孵育15分钟进行连接。反应结束后,立即加入DNA上样缓冲液(6X) (D0071)以终止反应,随后进行1%琼脂糖凝胶电泳检测,拍照观察结果。实验结果表明,Taq DNA Ligase能够对经BstEII酶切后的λDNA所产生的两条片段(Fragment 1和Fragment 4)进行有效连接,且本产品与N公司(Competitor)的Taq DNA Ligase相比,具有类似的连接BstEII酶切后的λDNA的效果。本图仅供参考,实际检测效果会因具体实验条件的不同而有所不同。
用途:通过引物延伸扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行突变;同源重组;双链DNA缺刻的修复;通过连接酶检测反应和连接酶链式反应进行等位基因分型检测(SNP分型检测等)。
来源:纯化自携带有Thermus thermophilus HB8的连接酶基因的E.coli重组菌株[1,4]。
酶活性:Taq DNA Ligase catalyzes the formation of a phosphodiester bond between the 5'-phosphate and the 3'-hydroxyl of two adjacent DNA strands. The strands to be ligated need to be hybridized and accurately paired, with no gap, to a complementary DNA strand. Taq DNA Ligase is active at 37-75°C.
活性定义:One unit is defined as the amount of enzyme required to give 50% ligation of the 12-base pair cohesive ends of 1µg of BstEII-digested λDNA in a total reaction volume of 50µl in 15minutes at 45ºC.
纯度:不含除Taq DNA Ligase之外的其它种类的DNA连接酶,不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶,不含磷酸酯酶。
酶储存液:10mM Tris-HCl, 50mM KCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 200ug/ml BSA, 50% Glycerol (pH7.4 @25ºC)。
10X Reaction Buffer: 200mM Tris-HCl, 250mM Potassium Acetate, 100mM Magnesium Acetate, 10mM NAD, 100mM DTT, 1% Triton X-100 (pH7.6 @25ºC)。
失活或抑制:不能进行热失活,需加入终止染液(50% Glycerol, 50mM EDTA, 50mM Bromophenol Blue)终止反应。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D7023S-1 | Taq DNA Ligase (40U/μl) | 50μl |
D7023S-2 | 10X Reaction Buffer | 0.25ml |
— | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D7023M-1 | Taq DNA Ligase (40U/μl) | 250μl |
D7023M-2 | 10X Reaction Buffer | 1.25ml |
— | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D7023L-1 | Taq DNA Ligase (40U/μl) | 1ml |
D7023L-2 | 10X Reaction Buffer | 5ml |
— | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存,两年有效。10X Reaction Buffer如果长期不使用,建议保存于-80ºC。
注意事项:10X Reaction Buffer中的DTT和NAD会逐渐发生反应并变成黄棕色,颜色变化并不影响酶反应体系的活性效果。确保每次使用完毕尽快冻存即可。
Taq DNA Ligase发挥其催化活性需要以NAD作为辅助因子。本产品提供的10X Reaction Buffer中含有NAD,如果长期不使用,建议保存于-80ºC以减缓NAD的降解。
Taq DNA Ligase不能代替T4 DNA Ligase进行双链DNA的连接反应。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Reagent | Volume |
10X Reaction Buffer | 5μl |
Ultrapure Water | (43-x)μl |
DNA | xμl (up to 1μg) |
Taq DNA Ligase (40U/μl) | 2μl (80U) |
Total Volume | 50μl |
温度(ºC) | 活性(units/ml) |
4 | 2000 |
16 | 8000-10000 |
25 | 12000 |
37 | 20000 |
45 | 40000 |
55 | 40000 |
65 | 64000 |
75 | 10000 |
85 | 3000-4000 |
95 | 500 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D0071 | DNA上样缓冲液(6X) | 2ml |
D0072 | BeyoRed DNA上样缓冲液(6X) | 2ml |
D0107 | DNA Ladder (0.1-10kb, 21 bands) | 100次 |
D0109 | DNA Ladder (0.1-10kb, 21 bands, with BeyoRed) | 100次 |
D0110 | DNA Ladder (0.2-12kb, 12 bands) | 100次 |
D0111 | DNA Ladder (0.2-12kb, 12 bands, with BeyoRed) | 100次 |
D0161S | BeyoGel™琼脂糖预制胶(1%, NA-Red, TAE, 8孔) | 10块 |
D0163S | BeyoGel™琼脂糖预制胶(2%, NA-Red, TAE, 8孔) | 10块 |
D7016S | E. coli DNA Ligase | 200U |
D7016M | E. coli DNA Ligase | 1KU |
D7016L | E. coli DNA Ligase | 5KU |
D6952S | 牛痘DNA拓扑异构酶Ⅰ | 200U |
D6952M | 牛痘DNA拓扑异构酶Ⅰ | 1KU |
D6952L | 牛痘DNA拓扑异构酶Ⅰ | 5KU |
D7002 | 快速DNA连接试剂盒 | 100次 |
D7003 | 快速DNA连接试剂盒 | 500次 |
D7006 | T4 DNA Ligase | 40KU |
D7008 | T4 DNA Ligase | 200KU |
D7009S | Instant T4 DNA Ligase | 40KU |
D7009M | Instant T4 DNA Ligase | 200KU |
D7010S | Seamless Cloning Kit (无缝克隆试剂盒) | 20次 |
D7010M | Seamless Cloning Kit (无缝克隆试剂盒) | 100次 |
D7018S | PBCV-1 DNA Ligase | 1250U |
D7018M | PBCV-1 DNA Ligase | 5KU |
D7019L | PBCV-1 DNA Ligase | 25KU |
D7019S | T3 DNA Ligase | 150KU |
D7019M | T3 DNA Ligase | 600KU |
D7020L | T3 DNA Ligase | 3000KU |
D7020S | T7 DNA Ligase | 150KU |
D7020M | T7 DNA Ligase | 600KU |
D7020L | T7 DNA Ligase | 3000KU |
D7021 | T4 RNA Ligase | 200U |
D7023S | Taq DNA Ligase | 2KU |
D7023M | Taq DNA Ligase | 10KU |
D7023L | Taq DNA Ligase | 40KU |
R0056-2ml | PEG8000 (50%, RNase free) | 2ml |
R0621S | T4 RNA Ligase 1 (ssRNA Ligase) | 1KU |
R0621M | T4 RNA Ligase 1 (ssRNA Ligase) | 5KU |
R0632S | T4 RNA Ligase 2 (dsRNA Ligase) | 1KU |
R0635S | T4 RNA Ligase 2, truncated | 5KU |
R0635M | T4 RNA Ligase 2, truncated | 20KU |
R0635L | T4 RNA Ligase 2, truncated | 100KU |
R0700S | 小RNA3'接头(5'腺苷化, 3'封闭及连接)试剂盒 | 20次 |
R0702S | Universal miRNA Cloning Linker (5'腺苷化3'封闭) | 1μg |
R0702M | Universal miRNA Cloning Linker (5'腺苷化3'封闭) | 5μg |
SF1136-10mM | SCR7 (DNA ligase IV抑制剂) | 10mM×0.2ml |
SF1136-5mg | SCR7 (DNA ligase IV抑制剂) | 5mg |
SF1136-25mg | SCR7 (DNA ligase IV抑制剂) | 25mg |