碧云天生产的RNase Inhibitor, Murine，即Murine Ribonuclease Inhibitor、鼠源核糖核酸酶抑制剂，是一种能按照1:1的比例、高亲和力、非共价键结合并抑制RNase A、RNase B、RNase C及其它多种类型核糖核酸酶的活性，从而保护RNA不被降解的核糖核酸酶抑制剂。与人源RNase Inhibitor相比，鼠源RNase Inhibitor由于不含感知氧化环境的一对半胱氨酸而具有更高的抗氧化能力，在低浓度DTT (小于1mM)环境下更稳定，是用于Real-time RT-PCR等高浓度DTT敏感的反应中保护RNA不被降解的理想选择[1,2]。

RNase Inhibitor, Murine对RNase A、RNase B、RNase C的活力具有极强且极快速的抑制效果，但并不能抑制RNase 1、RNase T1、S1 Nuclease、RNase H或Aspergillus属RNase的活性。

RNase Inhibitor, Murine不会影响AMV/M-MuLV Reverse Transcriptase、Taq DNA Polymerase、SP6/T7/T3 RNA Polymerase的活性，可在保护RNA的同时保证酶促反应的正常进行，广泛适用于RT-PCR、cDNA合成、体外转录、酶促RNA标记等大多数分子生物学反应[1,2]。

本产品N端带有His标签，反应完成后如有必要，溶液中的RNase Inhibitor, Murine可以通过相应的镍柱或His标签蛋白纯化琼脂糖磁珠吸附去除。镍柱推荐选购碧云天的BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) (P2210/P2218/P2220)或His标签蛋白纯化试剂盒(耐还原螯合型) (P2226)以及BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) (P2233)或His标签蛋白纯化试剂盒(耐变性剂型) (P2229)。His标签蛋白纯化琼脂糖磁珠推荐选购BeyoMag™ His标签蛋白纯化琼脂糖磁珠(P2239/P2241/P2243)。

碧云天生产的RNase Inhibitor, Murine用于抑制RNase A的活性以保护yeast RNA不被降解的效果请参考图1。

图1. 碧云天RNase Inhibitor, Murine (R0101)用于抑制RNase A的活性以保护yeast RNA不被降解的效果图。5µg yeast RNA与0或2ng RNase A及8、4、2、1、0.5、0.25或0U RNase Inhibitor，在100µl的反应体系(50mM MOPS, 5mM MgCl₂, pH6.5)中，37ºC孵育15分钟。反应完毕后立即取20µl反应产物用1%琼脂糖凝胶进行电泳分析。如图所示，本产品与Competitor公司的产品相比，具有类似或更优的抑制RNase活性的效果。实际操作时不同实验条件获得的实验结果会略有差异，图中效果仅供参考。

碧云天生产的RNase Inhibitor, Murine用于抑制RNase A的活性以保护HeLa细胞总RNA不被降解的效果请参考图2。

图2. 碧云天RNase Inhibitor, Murine (R0101)用于抑制RNase A的活性以保护HeLa细胞总RNA不被降解的效果。2µg HeLa细胞总RNA与0或0.5ng RNase A及20、10、5、2.5、1.25、0.625或0U RNase Inhibitor，在20µl的反应体系(50mM MOPS, 5mM MgCl₂, pH6.5)中，37ºC孵育15分钟。反应完毕后立即全部用1%琼脂糖凝胶进行电泳分析。如图所示，本产品与Competitor公司的产品相比，具有类似或更优的抑制RNase活性的效果。实际操作时不同实验条件获得的实验结果会略有差异，图中所示结果仅供参考。

用途：用于cDNA合成、RT-PCR、体外转录、体外翻译、酶促RNA标记反应、以及mRNA-protein复合物分离纯化等过程中保护RNA不被降解；还可用于特定RNase活性的鉴定等。

来源：纯化自携带编码小鼠RNase Inhibitor基因的E.coli重组菌株。

活性定义：One unit is defined as the amount of RNase Inhibitor required to inhibit the activity of 5ng of RNase A by 50%. Activity is measured by the inhibition of hydrolysis of cytidine 2', 3'-cyclic monophosphate by RNase A.

纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶。

储存溶液：20mM HEPES-KOH, 50 mM KCl, 5 mM DTT, 50% (v/v) Glycerol (pH7.6 @ 25ºC)。

失活或抑制：65ºC孵育10分钟可使RNase Inhibitor, Murine失活；SDS和尿素等会导致蛋白变性的试剂以及对氯汞基苯甲酸盐(p-chloromercuribenzoate)、重铬酸钾等氧化剂会抑制RNase Inhibitor与RNase的结合。

-20ºC保存，两年有效。

RNase Inhibitor, Murine在50ºC及以上会使其失活。为防止已与RNase形成复合物的RNase Inhibitor, Murine变性失活导致活性RNase的释放，应避免反应温度超过50ºC或选择可以耐受更高温度的RNase Inhibitor (R0102/R0106)。

每个反应中，推荐RNase Inhibitor, Murine的使用浓度为1U/μl，实际使用量可以根据样品中RNase的含量适当调整。

设置反应体系时，推荐将RNase Inhibitor, Murine优先于其它可能存在RNase污染的组分添加，以免造成RNA的降解。

RNase Inhibitor, Murine抑制RNase活性的适用pH值范围较广，pH5-9之间均对RNase活性有良好的抑制效果，尤其在pH7-8范围内对RNase的抑制效果更好。

加入RNase Inhibitor, Murine后，反应体系请避免剧烈振荡、涡旋或引入许多气泡，以免影响对RNase的抑制效果。

RNase Inhibitor, Murine可显著抑制RNase A、RNase B、RNase C的活力，但对RNase 1、RNase T1、S1 Nuclease、RNase H或Aspergillus属RNase的活性没有抑制效果。

使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20ºC保存。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。