产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
P1412-25μl | BeyoTSA™ Tyramide-Biotin (200X) | 25μl | 668.00元 |
P1412-100μl | BeyoTSA™ Tyramide-Biotin (200X) | 100μl | 1998.00元 |
碧云天的BeyoTSA™ Tyramide-substrate系列产品,包含BeyoTSA™ Tyramide-Biotin (200X)、BeyoTSA™ Tyramide-488 (200X)、BeyoTSA™ Tyramide-555 (200X)和BeyoTSA™ Tyramide-647 (200X)等九种酪酰胺底物,基于酪酰胺信号放大技术对细胞或组织样品进行免疫染色,适用于免疫染色时的信号放大及多重荧光染色或显色反应。
酪酰胺信号放大(Tyramide signal amplification)技术,简称TSA,也称催化信号放大(Catalyzed signal amplification/CSA、Catalyzed reporter deposition/CARD)技术,由于其信号放大及多重染色的特点,被广泛应用于IF (Immunofluorescence)、IHC (Immunohistochemistry)和ISH (In situ hybridization)等技术中,是检测细胞和组织中极低丰度或低丰度的靶抗原最灵敏的方法之一,在不损失样品分辨率的条件下可以显著提升靶抗原检测的精度和灵敏度。
图1.碧云天BeyoTSA™系列产品的检测原理图。图A为TSA技术的原理图,图B为BeyoTSA™多重荧光染色的流程图。
TSA是一种基于酶催化反应的高灵敏度信号放大技术,其主要原理是通过辣根过氧化物酶(HRP)催化酪酰胺底物(Tyramide-substrate,如Tyramide-488、Tyramide-Biotin等)生成含高活性自由基(Free radicals)的酪酰胺底物,即活性酪酰胺底物(Active Tyramide-substrate),这些自由基与邻近蛋白质如酪氨酸残基(Tyrosine residues)共价结合,从而在目标位点附近(约0.1-1μm)沉积大量标记物(如特定的荧光探针或生物素等),实现信号级联放大[1-3]。本系列产品信号级联放大的原理请参考图1A。在第一轮一抗和二抗孵育以及TSA Reagent反应结束后,可以通过免疫染色抗体洗脱液或热修复法去除非共价结合在靶抗原上的抗体复合物,同时又稳定保留共价结合的荧光探针。后续可不必考虑上一轮实验中抗体的交叉干扰,即可直接使用不同或相同种属来源的抗体进行后续轮次的孵育,从而标记其它靶抗原。如此重复循环染色,待所有抗体及对应酪酰胺底物孵育结束后,再进行所有染色结果的检测,实现同一个样品上的多重荧光染色(图1B)。
本系列产品种类丰富,包含9种底物,用户可根据实际检测设备荧光通道的具体参数选择合适的酪酰胺底物进行组合搭配;本系列产品灵敏度高,可以用于传统方法无法检出的低丰度靶抗原的检测;本系列产品可节约抗体,基于酪酰胺信号放大技术能够极大地降低抗体的用量;本系列产品稳定性强,可与传统染色方法结合使用进行多色成像,不易被洗脱掉,可进行两个或更多个酪胺反应从而标记一个样品上的不同靶标。
本系列产品与Thermo公司Tyramide SuperBoost™ Kits with Alexa Fluor™ Tyramides属于同类产品。
对于组织切片、细胞爬片或涂片、96孔板细胞样品,按照每个样品需要50μl TSA染色工作液计算,本系列产品小包装和中包装分别可用于100或400个样品的靶蛋白的单色标记检测。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P1412-25μl | BeyoTSA™ Tyramide-Biotin (200X) | 25μl |
P1412-100μl | BeyoTSA™ Tyramide-Biotin (200X) | 100μl |
P1415-25μl | BeyoTSA™ Tyramide-350 (200X) | 25μl |
P1418-25μl | BeyoTSA™ Tyramide-440 (200X) | 25μl |
P1423-25μl | BeyoTSA™ Tyramide-488 (200X) | 25μl |
P1423-100μl | BeyoTSA™ Tyramide-488 (200X) | 100μl |
P1426-25μl | BeyoTSA™ Tyramide-532 (200X) | 25μl |
P1429-25μl | BeyoTSA™ Tyramide-555 (200X) | 25μl |
P1429-100μl | BeyoTSA™ Tyramide-555 (200X) | 100μl |
P1432-25μl | BeyoTSA™ Tyramide-594 (200X) | 25μl |
P1432-100μl | BeyoTSA™ Tyramide-594 (200X) | 100μl |
P1435-25μl | BeyoTSA™ Tyramide-647 (200X) | 25μl |
P1435-100μl | BeyoTSA™ Tyramide-647 (200X) | 100μl |
P1437-25μl | BeyoTSA™ Tyramide-680 (200X) | 25μl |
- | 说明书 | 1份 |
-20ºC避光保存,一年有效。
注意事项:BeyoTSA™ Tyramide-substrate的量较少,融化后建议先瞬时离心,使附着在管盖或管壁上的液体聚集于管底,然后适当混匀后再使用。
须根据实际检测设备荧光通道的具体参数选择合适的酪酰胺底物或多重染色试剂盒。BeyoTSA™ Tyramide-substrate的荧光光谱信息见附录。碧云天是以激发波长进行酪酰胺底物的命名,有些同类产品可能是以发射波长进行命名,请注意区别。
TSA Reaction Buffer、免疫染色抗体洗脱液、DAPI染色液、组织自发荧光淬灭剂和抗荧光淬灭封片液,可以单独向碧云天订购TSA Reaction Buffer (P1451)、免疫染色抗体洗脱液(P1453)、DAPI染色液(C1006)、组织自发荧光淬灭剂(P0122)和抗荧光淬灭封片液(P0126)。单标酪酰胺信号放大试剂盒及其它多重荧光染色试剂盒详见相关产品,使用更便捷。所需一抗及相关二抗,推荐碧云天适用于免疫组化的高品质BeyoIHC™系列抗体、辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG(H+L) (A0208)、辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG(H+L) (A0216)等。
TSA技术有更高的灵敏度和更强的信号,因此一抗和二抗使用浓度需适当降低,可根据实验结果调整抗体稀释比例,通常可在正常IHC使用的稀释比例的基础上再稀释2-10倍,以减少非特异性结合引起的背景荧光。可在初次检测时设置不同稀释比例进行优化。
荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
若短期内使用频繁,可置于4ºC保存,至少1-2周内有效。宜尽量减少反复冻融。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Samples | 1 | 2 | 10 | 20 |
BeyoTSA™ Tyramide-substrate (200X) | 0.25μl | 0.5μl | 2.5μl | 5μl |
0.3% Hydrogen Peroxide Solution | 0.25μl | 0.5μl | 2.5μl | 5μl |
TSA Reaction Buffer (P1451) | 50μl | 100μl | 500μl | 1000μl |
Total Volume | ~50μl | ~100μl | ~500μl | ~1000μl |
BeyoTSA™ Tyramide-substrate | Ex/Em (nm) | Fluorescence Color |
BeyoTSA™ Tyramide-350 | ~350/448 | Blue |
BeyoTSA™ Tyramide-440 | ~429/475 | Blue |
BeyoTSA™ Tyramide-488 | ~488/515 | Green |
BeyoTSA™ Tyramide-532 | ~531/554 | Yellow |
BeyoTSA™ Tyramide-555 | ~550/561 | Orange Red |
BeyoTSA™ Tyramide-594 | ~585/609 | Red |
BeyoTSA™ Tyramide-647 | ~641/658 | Far-Red |
BeyoTSA™ Tyramide-680 | ~680/700 | Near-infrared |
BeyoTSA™ Tyramide-750 | ~750/780 | Near-infrared |
DAPI | ~364/454 | Blue |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P1342 | BeyoTSA™双标三色多重荧光染色试剂盒(488/555/DAPI) | 100次/400次 |
P1349 | BeyoTSA™双标三色多重荧光染色试剂盒(488/594/DAPI) | 100次/400次 |
P1351 | BeyoTSA™三标四色多重荧光染色试剂盒(488/555/647/DAPI) | 100次/400次 |
P1353S | BeyoTSA™四标五色多重荧光染色试剂盒 | 100次 |
P1356S | BeyoTSA™五标六色多重荧光染色试剂盒 | 100次 |
P1371 | BeyoTSA™酪酰胺信号放大试剂盒(Tyramide-Biotin) | 100次/400次 |
P1375S | BeyoTSA™酪酰胺信号放大试剂盒(Tyramide-350) | 100次 |
P1378S | BeyoTSA™酪酰胺信号放大试剂盒(Tyramide-440) | 100次 |
P1382 | BeyoTSA™酪酰胺信号放大试剂盒(Tyramide-488) | 100次/400次 |
P1386S | BeyoTSA™酪酰胺信号放大试剂盒(Tyramide-532) | 100次 |
P1389 | BeyoTSA™酪酰胺信号放大试剂盒(Tyramide-555) | 100次/400次 |
P1391 | BeyoTSA™酪酰胺信号放大试剂盒(Tyramide-594) | 100次/400次 |
P1393 | BeyoTSA™酪酰胺信号放大试剂盒(Tyramide-647) | 100次/400次 |
P1396S | BeyoTSA™酪酰胺信号放大试剂盒(Tyramide-680) | 100次 |
P1412 | BeyoTSA™ Tyramide-Biotin (200X) | 25μl/100μl |
P1415-25μl | BeyoTSA™ Tyramide-350 (200X) | 25μl |
P1418-25μl | BeyoTSA™ Tyramide-440 (200X) | 25μl |
P1423 | BeyoTSA™ Tyramide-488 (200X) | 25μl/100μl |
P1426-25μl | BeyoTSA™ Tyramide-532 (200X) | 25μl |
P1429 | BeyoTSA™ Tyramide-555 (200X) | 25μl/100μl |
P1432 | BeyoTSA™ Tyramide-594 (200X) | 25μl/100μl |
P1435 | BeyoTSA™ Tyramide-647 (200X) | 25μl/100μl |
P1437-25μl | BeyoTSA™ Tyramide-680 (200X) | 25μl |
P1451 | TSA Reaction Buffer | 100ml/500ml |
P1453 | 免疫染色抗体洗脱液 | 50ml/250ml |
C1006 | DAPI染色液 | 10ml/50ml/200ml |
P0122 | 组织自发荧光淬灭剂 | 10ml/50ml |
P0126 | 抗荧光淬灭封片液 | 5ml/25ml |