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遗传操作神器: 可自行进入细胞的TAT-Cre重组酶

基因编辑是现代生命科学研究中的重要利器,而Cre-LoxP系统以其特异性强、灵活性高成为构建基因敲除、条件性激活等模型的首选工具。然而,传统Cre重组酶的表达通常需要通过构建转基因小鼠后进行杂交或通过注射AAV病毒等以实现Cre重组酶的表达,在实验操作上费时费力,存在很大的局限性,常令科研人员感到棘手(详细原理请戳:Cre-LoxP)。

碧云天生物全新推出的TAT-Cre Recombinase(货号:D0512) 以突破性设计打破这一瓶颈,可以自行进入细胞,为基因编辑实验提供了高效、简便的全新解决方案!和使用AAV等病毒载体相比,毒性和免疫原性更低!

TAT-Cre Recombinase的独特优势

  1. 突破性递送技术
    碧云天研发的细胞渗透性TAT-Cre Recombinase融合了源自于HIV-1病毒的细胞穿透肽TAT,可以直接穿透细胞膜,实现靶向递送,催化高效重组,无需依赖病毒载体或复杂的电转染技术,大幅简化操作流程!
  2. 精准可靠的基因重组
    专为loxP位点精准设计,TAT-Cre Recombinase在体内外均展现了高效率的基因剪切能力!
  3. 操作简单灵活
    只需将TAT-Cre Recombinase直接加入细胞培养基,即可完成基因编辑实验,省去繁琐的载体构建步骤,让实验更高效!
  4. 兼容多种应用场景
    适用于多种细胞类型(如293T、HeLa),成功攻克在哺乳动物细胞中表达传递难题!

产品效果

图1.碧云天TAT-Cre Recombinase (D0512)介导两个同向loxP位点之间序列切除的效果图。图A为实验原理。在没有TAT-Cre Recombinase存在的情况下,mCherry的表达会被阻断,观察不到红色荧光;TAT-Cre Recombinase存在的情况下,可以对loxP位点进行重组,去除两个loxP位点之间的STOP元件,从而激活mCherry的表达。图B为实验结果。

产品原理

图2. Cre-loxP位点特异性重组示意图。

Cre Recombinase是来源于大肠杆菌噬菌体P1的一种I型拓朴异构酶(Type I topoisomerase),也是一种酪氨酸重组酶(Tyrosine recombinase),能识别34bp的loxP位点,两端为两个13bp的反向重复序列(Inverted repeats, ATAACTTCGTATA and TATACGAAGTTAT),中间是8bp的间隔区(Spacer region, NNNTANNN),并能催化loxP位点之间的DNA发生重组。重组产物根据loxP位点的位置和相对方向的不同而不同,两个含单loxP位点的DNA将发生融合:两个同方向的loxP位点间的DNA将以环状形式被切割,而两个反向loxP位点间的DNA序列将被翻转(图2)。

细胞穿透肽TAT是来源于自HIV-1病毒复制和基因表达所必须的反式激活因子中的一段约10个氨基酸的带有正电荷的肽段。目前有研究表明,TAT融合蛋白可以通过Caveolar介导的胞吞作用(Caveolar endocytosis)被细胞内化,不依赖于网格蛋白介导的胞吞作用。因而可以使得与之融合后的各种分子(包括多肽、蛋白质、反义寡核苷酸链、磁性纳米颗粒和脂质体)能够穿透细胞膜,可以适用于很多方面的应用。

立即行动!解锁基因编辑新可能

产品编号 产品名称 包装 产品价格
D0512-200μg TAT-Cre Recombinase 200μg
D0512-1mg TAT-Cre Recombinase 1mg
D0512-5mg TAT-Cre Recombinase 5mg
C7998 LoxP-STOP-loxP-mCherry HeLa Cells 1支/瓶
C7996 LoxP-STOP-loxP-EGFP HeLa Cells 1支/瓶