基因编辑是现代生命科学研究中的重要利器,而Cre-LoxP系统以其特异性强、灵活性高成为构建基因敲除、条件性激活等模型的首选工具。然而,传统Cre重组酶的表达通常需要通过构建转基因小鼠后进行杂交或通过注射AAV病毒等以实现Cre重组酶的表达,在实验操作上费时费力,存在很大的局限性,常令科研人员感到棘手(详细原理请戳:Cre-LoxP)。
碧云天生物全新推出的TAT-Cre Recombinase(货号:D0512) 以突破性设计打破这一瓶颈,可以自行进入细胞,为基因编辑实验提供了高效、简便的全新解决方案!和使用AAV等病毒载体相比,毒性和免疫原性更低!
TAT-Cre Recombinase的独特优势
产品效果
图1.碧云天TAT-Cre Recombinase (D0512)介导两个同向loxP位点之间序列切除的效果图。图A为实验原理。在没有TAT-Cre Recombinase存在的情况下,mCherry的表达会被阻断,观察不到红色荧光;TAT-Cre Recombinase存在的情况下,可以对loxP位点进行重组,去除两个loxP位点之间的STOP元件,从而激活mCherry的表达。图B为实验结果。
产品原理
图2. Cre-loxP位点特异性重组示意图。
Cre Recombinase是来源于大肠杆菌噬菌体P1的一种I型拓朴异构酶(Type I topoisomerase),也是一种酪氨酸重组酶(Tyrosine recombinase),能识别34bp的loxP位点,两端为两个13bp的反向重复序列(Inverted repeats, ATAACTTCGTATA and TATACGAAGTTAT),中间是8bp的间隔区(Spacer region, NNNTANNN),并能催化loxP位点之间的DNA发生重组。重组产物根据loxP位点的位置和相对方向的不同而不同,两个含单loxP位点的DNA将发生融合:两个同方向的loxP位点间的DNA将以环状形式被切割,而两个反向loxP位点间的DNA序列将被翻转(图2)。
细胞穿透肽TAT是来源于自HIV-1病毒复制和基因表达所必须的反式激活因子中的一段约10个氨基酸的带有正电荷的肽段。目前有研究表明,TAT融合蛋白可以通过Caveolar介导的胞吞作用(Caveolar endocytosis)被细胞内化,不依赖于网格蛋白介导的胞吞作用。因而可以使得与之融合后的各种分子(包括多肽、蛋白质、反义寡核苷酸链、磁性纳米颗粒和脂质体)能够穿透细胞膜,可以适用于很多方面的应用。
立即行动!解锁基因编辑新可能
产品编号 | 产品名称 | 包装 | 产品价格 |
D0512-200μg | TAT-Cre Recombinase | 200μg | |
D0512-1mg | TAT-Cre Recombinase | 1mg | |
D0512-5mg | TAT-Cre Recombinase | 5mg | |
C7998 | LoxP-STOP-loxP-mCherry HeLa Cells | 1支/瓶 | |
C7996 | LoxP-STOP-loxP-EGFP HeLa Cells | 1支/瓶 |