Avi标签是由15个氨基酸(GLNDIFEAQKIEWHE)组成的短肽标签,在ATP和生物素存在的条件下,强大的高特异性生物素连接酶BirA催化生物素共价结合到目的蛋白的Avi标签上,从而对目的蛋白进行生物素标记。
生物素连接酶BirA特异性生物素标记Avi-tag有多方面的优点:
✔ Avi标签小且对融合蛋白的影响非常小,只针对Avi标签上的Lys残基进行特定位置的生物素标记,生物素标记效率高,可重复性好;
✔ 体内或体外均可进行标记,标记后的蛋白与链霉亲和素(Streptavidin)的亲和力高,从而使Avi-tag技术可以应用于目的蛋白的固定吸附、纯化和检测等;
✔ 相比于传统生物素化学标记的非特异性位点的标记,BirA催化的反应条件更温和,对被标记蛋白活力影响小,酶活效率高,标记特异性强。
利用Avi-tag技术,碧云天全新推出一系列生物素标记质粒产品,该系列产品可在体内或体外高效完成对目的蛋白的生物素标记。该系列产品分为真核表达载体和原核表达载体,分别适用于在哺乳动物细胞和大肠杆菌中表达特定目的蛋白。
真核载体
质粒名称 | 抗性 | 产品特点 |
pCMV-N-3X Flag-Avi-SUMOEU1-Neo | 氨苄青霉素抗性+新霉素抗性 | 含3X Flag tag、Avi tag及SUMOEU1 tag,SUMO标签可被相应蛋白酶特异性识别并切割 |
pCMV-N-3X Flag-SUMOEU1-MCS-Avi | 氨苄青霉素抗性+新霉素抗性 | 含3X Flag tag、SUMOEU1 tag及Avi tag,SUMO标签可被相应蛋白酶特异性识别并切割 |
pCMV-N-3X Flag-Avi-SUMOEU1-MCS-IRES-BirA | 氨苄青霉素抗性+新霉素抗性 | 共表达质粒,可实现含3X Flag tag、Avi tag及SUMOEU1 tag的目的蛋白和BirA的共表达 |
pCMV-N-3X Flag-SUMOEU1-MCS-Avi-IRES-BirA | 氨苄青霉素抗性+新霉素抗性 | 共表达质粒,可实现含3X Falg tag、SUMOEU1 tag及Avi tag的目的蛋白和BirA的共表达 |
上述质粒含Flag标签,表达的目的蛋白可通过Anti-Flag磁珠(P2115)或Anti-Flag亲和凝胶(P2271/P2282)进行纯化。生物素标记蛋白可以通过碧云天的BeyoMag™ Streptavidin Magnetic Beads (链霉亲和素磁珠) (P2151)进行免疫沉淀,或者通过辣根过氧化物酶标记Streptavidin (A0303)和碱性磷酸酯酶标记Streptavidin (A0312)进行原位检测或免疫印迹检测。
原核载体
质粒名称 | 抗性 | 产品特点 |
pET-N-His-Avi | 卡那霉素抗性 | His tag和Avi tag位于多克隆位点前 |
pET-His-MCS-Avi | 氨苄青霉素抗性 | 多克隆位点位于His tag和Avi tag之间 |
pET-N-Avi-His-SUMO3 | 氨苄青霉素抗性 | N端带有Avi tag、His tag以及SUMO3 tag,SUMO标签可被相应蛋白酶特异性识别并切割 |
pET-N-His-SUMO3-Avi | 氨苄青霉素抗性 | N端带有His tag、SUMO3 tag以及Avi tag,SUMO标签可被相应蛋白酶特异性识别并切割 |
pET-Dual-His-MCS-Avi-BirA | 氨苄青霉素抗性 | 共表达质粒,可在IPTG的诱导下高效启动目的蛋白和BirA的共表达,一组多克隆位点位于His tag和Avi tag之间;另一组表达带有S tag的BirA, |
pET-Dual-Avi-His-SUMO3-MCS-BirA | 氨苄青霉素抗性 | 共表达质粒,可在IPTG的诱导下高效启动目的蛋白和BirA的共表达,一组His tag、Avi tag和SUMO3 tag位于多克隆位点前;另一组表达带有S tag的BirA |
pET-Dual-His-SUMO3-Avi-MCS-BirA | 氨苄青霉素抗性 | 共表达质粒,可在IPTG的诱导下高效启动目的蛋白和BirA的共表达,一组His tag、SUMO3 tag和Avi tag位于多克隆位点前;另一组表达带有S tag的BirA |
上述质粒含His标签,表达的目的蛋白可以采用如BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) (P2210/P2218/P2220)、His标签蛋白纯化试剂盒(耐还原螯合型) (P2226)以及BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) (P2233)、His标签蛋白纯化试剂盒(耐变性剂型) (P2229S)、BeyoMag™ Anti-His Magnetic Beads (Anti-His磁珠)(P2135)等进行纯化。
订购信息:
产品编号 | 产品名称 | 包装 | 产品价格 |
D2975-1μg/100μg | pCMV-N-3X Flag-Avi-SUMOEU1-Neo (Avi标签质粒) | 1μg/100μg | / |
D2977-1μg/100μg | pCMV-N-3X Flag-Avi-SUMOEU1-MCS-IRES-BirA(生物素标记质粒) | 1μg/100μg | / |
D2979-1μg/100μg | pCMV-N-3X Flag-SUMOEU1-MCS-Avi (Avi标签质粒) | 1μg/100μg | / |
D2981-1μg/100μg | pCMV-N-3X Flag-SUMOEU1-MCS-Avi-IRES-BirA (生物素标记质粒) | 1μg/100μg | / |
D3002-1μg/100μg | pET-N-His-Avi (Avi标签原核表达质粒) | 1μg/100μg | / |
D3005-1μg/100μg | pET-His-MCS-Avi (Avi标签原核表达质粒) | 1μg/100μg | / |
D3007-1μg/100μg | pET-N-Avi-His-SUMO3 (Avi标签原核表达质粒) | 1μg/100μg | / |
D3009-1μg/100μg | pET-N-His-SUMO3-Avi (Avi标签原核表达质粒) | 1μg/100μg | / |
D3013-1μg/100μg | pET-Dual-His-MCS-Avi-BirA (生物素标记原核表达质粒) | 1μg/100μg | / |
D3015-1μg/100μg | pET-Dual-Avi-His-SUMO3-MCS-BirA(生物素标记原核表达质粒) | 1μg/100μg | / |
D3017-1μg/100μg | pET-Dual-His-SUMO3-Avi-MCS-BirA(生物素标记原核表达质粒) | 1μg/100μg | / |
相关产品: