pCMV-C-His

 产品编号: D2650
 产品包装: 1μg
 产品价格: 862.00元
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产品简介

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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D2650 pCMV-C-His 1μg 862.00元

    pCMV-C-His是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达C端和His tag(His标签)融合的目的蛋白
的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的5'端含有一个可以编码His标签的序列,因此可以表达出含有His标签的融合蛋白,可以方便地使用抗His的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
    pCMV-C-His质粒的主要信息如下:
    Feature Nucleotide                                             Position
    CMV promoter                                                   1-602
    T3 promoter and T3 primer binding site                         620-639
    multiple cloning site                                          680-740
    c-His tag                                                      741-758
    T7 promoter and T7 primer binding site                         811-832
    SV40 polyA signal                                              844-1227
    f1 origin of ss-DNA replication                                1365-1669
    bla promoter                                                   1694-1818
    SV40 promoter                                                  1838-2176
    neomycin/kanamycin resistance ORF                              2211-3002
    HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal                         3003-3461
    pUC origin                                                     3590-4257
    pCMV-C-His质粒的图谱如下:
    
    pCMV-C-His的多克隆位点的详细图谱如下:
                                       XmaI                 PstI
        SacI                           SmaI    BamHI  HindIII
    651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCTCTAGC CCGGGCGGAT CCAAGCTTCT
        CTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGAGATCG GGCCCGCCTA GGTTCGAAGA
                                                       His tag
            EcoRI  EcoRV SalI   BglII XhoI   XbaI   H  H  H  H
    701 GCAGGAATTC GATATCGTCG ACAGATCTCT CGAGTCTAGA CATCATCACC
        CGTCCTTAAG CTATAGCAGC TGTCTAGAGA GCTCAGATCT GTAGTAGTGG
                
          H  H      ApaI
    751 ATCACCATTA AGGGCCCGGT ACCTTAATTA ATTAAGGTAC CAGGTAAGTG
        TAGTGGTAAT TCCCGGGCCA TGGAATTAAT TAATTCCATG GTCCATTCAC
    pCMV-C-His中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-His)包括:
    Afl II    Age I    Ahd I       Asc I     Bbs I    Bbv II      Blp I
    Bsg I     BsiW I   BsmB I      BspM II   BsrG I   BssH II     Bst1107 I
    BstE II   Ear I    Eco47 III   Eco72 I   EcoN I   Esp I       Fse I
    Nru I     PflM I   Pme I       Pml I     PpuM I   Psp1406 I   Sap I
    Sca I     Spe I
    pCMV-C-His中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-His once)包括:

Nde I      CA`TA,TG        241
SnaB I     TAC|GTA         347
Nhe I      G`CTAG,C        598
Sac I      G,AGCT`C        656
Sac II     CC,GC`GG        663
BstX I     CCAN,NNNN`NTGG  664
Not I      GC`GGCC,GC      669
PspA I     C`CCGG,G        681
Xma I      C`CCGG,G        681
Srf I      GCCC|GGGC       683
Sma I      CCC|GGG         683
BamH I     G`GATC,C        688
Hind III   A`AGCT,T        694
Pst I      C,TGCA`G        704
EcoR I     G`AATT,C        706
EcoR V     GAT|ATC         714
Sal I      G`TCGA,C        718
Acc I      GT`MK,AC        719
Bgl II     A`GATC,T        724
PaeR7 I    C`TCGA,G        730
Xho I      C`TCGA,G        730
Xba I      T`CTAG,A        736
Bsp120 I   G`GGCC,C        763
Apa I      G,GGCC`C        767

Pvu I       CG,AT`CG            845
Bcl I       T`GATC,A            999
Mun I       C`AATT,G           1092
Hpa I       GTT|AAC            1105
Mlu I       A`CGCG,T           1228
Dra III     CAC,NNN`GTG        1458
Sfi I       GGCCN,NNN`NGGCC    2115
BseR I      GAGGAG 16/14       2158
Stu I       AGG|CCT            2161
Cla I       AT`CG,AT           2180
Kas I       G`GCGC,C           2339
Nar I       GG`CG,CC           2340
Ehe I       GGC|GCC            2341
Bbe I       G,GCGC`C           2343
Msc I       TGG|CCA            2422
Tth111 I    GACN`N,NGTC        2458
BsrD I      GCAATG, 8          2573
Bsp1286 I   G,DGCH`C           2643
Rsr II      CG`GWC,CG          2856
BsiC I      TT`CG,AA           3022
BstB I      TT`CG,AA           3022
Bsa I       GGTCTC 7/11        3329
HgiE II     ACCNNNNNNGGT-1/13  3669
ApaL I      G`TGCA,C           3944

    pCMV-C-His质粒中对于插入片段进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下:
    T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
    T7 primer(811-832): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
    pCMV-C-His的全序列信息: D2650-pCMV-C-His-seq.txt
包装清单:

产品编号

产品名称

包装

D2650

pCMV-C-His

1μg

说明书

1份

保存条件:
   -20℃保存。
注意事项:
    本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人
或单位。
    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。
   抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. pCMV-C-His质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,需注意插入基因片段和tag之间
   的读码框要一致,即需要避免发生移码突变。构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

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