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BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (NHS磁珠, 200nm)
产品编号: ST422-200ml
产品包装:200ml
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价格: ¥ 15018.00
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
ST422-5ml BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (NHS磁珠, 200nm) 5ml 639.00元
ST422-50ml BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (NHS磁珠, 200nm) 50ml 4818.00元
ST422-200ml BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (NHS磁珠, 200nm) 200ml 15018.00元

碧云天生产的BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (NHS磁珠),也称NHS化磁珠、NHS衍生化磁珠、NHS衍生微珠、NHS Derivatized Beads,是一类由N-羟基-琥珀酰亚胺(N-Hydroxysuccinimide, NHS)包覆的高品质亚微米尺度粒径四氧化三铁微球(Fe3O4 microspheres)制备,无需活化,可快速、高效、灵敏、特异性地与多肽、蛋白、抗体、寡聚核苷酸等生物分子共价偶联,后续可以用于免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)、细胞分选、DNA-蛋白相互作用等,是医学和生命学研究中的重要载体工具。

磁分离是一种利用外部磁场对磁性材料的作用力,在保留生物活性的同时结合并分离生物分子、细胞的方法,具有吸附量大、分离速度快、效率高、可重复使用、操作简单等特点[1,2]。常规的四氧化三铁微球作为常用的磁性材料磁响应性高、生物相容性极佳,但表面未经修饰,不稳定,易发生自身的聚集和沉淀。常见的含功能基团的磁珠有NHS磁珠、羧基磁珠和氨基磁珠,是在磁珠的壳层结构包被有NHS、羧基或氨基官能团,以降低磁珠本身的聚集和沉淀;NHS磁珠无需活化,可以直接使用;羧基磁珠显酸性,在酸性缓冲液中通常用EDC/NHS等进行活化,而氨基磁珠显碱性,在碱性缓冲液中通常用戊二醛等进行活化。本NHS磁珠系列产品为NHS包覆的超顺磁性四氧化三铁微球的水相悬浮液,采用的先进技术使磁珠与柠檬酸或高分子材料完美结合,是一种新型功能化磁性微球。与传统磁珠相比,本NHS磁珠系列产品具有超顺磁性、高NHS密度、快速磁响应性、单分散性、分离速度快、回收率高、特异性强等多方面的优点,能便捷高效地与多种生物分子(多肽、蛋白、抗体等)进行高载量结合,也可作为良好的基础材料进行包被、吸附、化学改性等后续处理。同时,本NHS磁珠系列产品的柠檬酸/聚合物外壳可保护与磁珠结合的目标分子免受铁元素的负面影响。

BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (NHS磁珠)与蛋白、抗体等生物分子共价偶联的基本原理如下。生物偶联是通过化学共价键结合生物分子的过程,生物偶联试剂含有具有反应活性的末端,可与特定功能基团(如伯氨基、巯基)反应。伯胺(-NH2)存在于每条多肽链的N-末端以及赖氨酸残基的侧链中。由于伯胺带正电荷,因此它通常在蛋白质的外表面,使其更易于偶联而不会改变蛋白质结构。NHS磁珠无需活化,只需简单地将含伯氨基的生物配体溶解在Coupling Buffer中,室温下将蛋白与NHS磁珠混合1-2小时便可将生物配体共价偶联到磁珠上。本NHS磁珠系列产品进行蛋白等生物分子偶联的流程参考图1。

图1.碧云天BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (NHS磁珠) (ST422/ST425/ST428)生物分子偶联流程图(以偶联蛋白为例)。

本NHS磁珠系列产品特异性强、配基密度高、结合量高。与国内外大多数的同类产品相比,本NHS磁珠系列产品NHS密度高,对带有伯氨基的生物分子具有很强的反应特异性。本NHS磁珠系列产品包含200nm、500nm和1µm三种粒径可供选择,每毫升磁珠悬浊液含约10mg磁珠,可反应结合不少于0.6mg IgG抗体,具体的最大结合量和生物分子的分子量大小等相关。

本NHS磁珠系列产品与生物分子的反应速度快。本NHS磁珠系列产品NHS密度高,NHS磁珠能快速地与带有伯氨基生物分子发生偶联,无需活化,节省了操作时间。

本NHS磁珠系列产品分散性和重悬性良好。本NHS磁珠系列产品进行了柠檬酸或高分子材料修饰,避免了磁珠的团聚,使磁珠具有良好的单分散性和稳定的物理化学性质,磁珠进行生物分子偶联反应时具有很好地重复性和便捷性。

本NHS磁珠系列产品的主要指标请参考下表:

Product Cat. No. ST422 ST425 ST428
Product content 10mg/ml magnetic beads in specific protective buffer 10mg/ml magnetic beads in specific protective buffer 10mg/ml magnetic beads in specific protective buffer
Beads size ~200nm ~500nm ~1µm
Density of NHS ~200µmol/g ~200µmol/g ~300µmol/g
Type of magnetization Superparamagnetic
(no magnetic memory)
Superparamagnetic
(no magnetic memory)
Superparamagnetic
(no magnetic memory)
Magnetic core Fe3O4 Fe3O4 Fe3O4
Shell Citric acid Polymer Polymer
包装清单:
产品编号 产品名称 包装
ST422-5ml BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (200nm) 5ml
ST422-50ml BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (200nm) 50ml
ST422-200ml BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (200nm) 200ml
ST425-5ml BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (500nm) 5ml
ST425-50ml BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (500nm) 50ml
ST425-200ml BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (500nm) 200ml
ST428-5ml BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (1µm) 5ml
ST428-50ml BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (1µm) 50ml
ST428-200ml BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (1µm) 200ml
说明书 1份
保存条件:

室温或者4ºC保存,两年有效。

注意事项:

须根据生物分子的特性选择合适的功能基团及粒径的磁珠。

本NHS磁珠系列产品对水非常敏感,为了避免NHS磁珠潮解,取完磁珠需立即盖好,并用封口膜封好盖子,于4ºC保存。

本NHS磁珠系列产品需维持pH为6-8,避免高速离心、干燥;请勿长时间将磁珠置于磁场中,否则可能会引起磁珠聚团。

本NHS磁珠系列产品使用前要适当充分重悬,即颠倒若干次使磁珠混合均匀,充分震荡或超声使磁珠呈均匀的悬浮状态。

为保证最佳的偶联效果,偶联缓冲液不能含有Tris等带伯氨基的溶液。

蛋白稳定剂(如BSA、明胶等)会抑制蛋白/抗体与NHS磁珠的结合,因此在NHS磁珠偶联蛋白/抗体时,需要确保蛋白/抗体体系中不存在含伯氨基的蛋白稳定剂。蛋白样品溶液中也不能含有Tris、甘氨酸等其它含有伯氨基的物质。

如果使用真空泵等仪器吸取上清液,须注意真空泵的吸液强度,以免吸力过大而吸取到聚集的磁珠。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.试剂的准备:
Solution/Buffer Components
Washing Buffer 1mM HCl, Keep at 4ºC before use
Coupling Buffer A 100mM MES, pH4.8 (Isoelectric point<7)
Coupling Buffer B 200mM NaHCO3, pH8.3 (Isoelectric point>7)
Blocking Solution 1% BSA, 3M Ethanolamine, pH9.0
Protective Solution 1X PBS with 0.02% NaN3 or ProClean 300 (ST853)
2.NHS磁珠准备:
由于磁珠储存在特殊保护液中,所以需要在加入样品前适当洗涤。
a.用移液器轻轻吹打重悬磁珠,取100μl磁珠重悬液至一洁净离心管中(FTUB015),磁性分离去除上清,用500μl预冷的Washing Buffer重悬磁珠。
b.用移液器轻轻吹打磁珠,置于磁力架(FMS012/FMS024)上分离10秒,去除上清。重复上述步骤两次。
3.NHS磁珠偶联生物分子(以蛋白为例):
a.偶联。加入100μl蛋白溶液(0.5-2mg/ml,参考蛋白的等电点,用对应的Coupling Buffer配制),轻柔地混匀。测试反应前体系中的蛋白浓度(记录为c1)。25ºC偶联2小时,或者25ºC偶联1小时后转入4ºC过夜进行偶联,期间保持磁珠的悬浮状态,可置于侧摆摇床或旋转混合仪上进行偶联反应。推荐使用BeyoShaker™数字式翘板摇床(E6673)或BeyoVortex™基础型旋转混匀仪(E6800)。
注1:蛋白溶液中不能含有带有伯氨基的成分,如Tris、甘氨酸、明胶、BSA等。
注2:已经保存于Buffer中的蛋白,需要通过脱盐的方法去除原有Buffer里的含伯氨基的物质,推荐碧云天脱盐柱(P2603/P2605/P2607/P2613/P2615/P2617)进行脱盐处理。使用脱盐柱处理可以有效去除Tris、甘氨酸等干扰物质。
4.NHS磁珠封闭:
a.反应结束后,置于磁力架上分离10秒,去除上清。测试反应后体系中的蛋白浓度(记录为c2),c1和c2可用于计算磁珠偶联的蛋白量。
b.加入200-500μl Blocking Solution重悬磁珠,25ºC反应2-4小时或4ºC反应过夜,以封闭磁珠表面未结合的位点,期间保持磁珠的悬浮状态,可置于侧摆摇床或旋转混合仪上进行封闭反应。
5.磁珠保存:
a.反应结束后,置于磁力架上分离10秒,去除上清。用200-500μl Blocking Solution重悬磁珠。
b.用移液器轻轻吹打磁珠,置于磁力架(FMS012/FMS024)上分离10秒,去除上清。重复上述步骤两次。
c.加入50-100μl Protective Solution重悬磁珠,保存于2-8ºC。
参考文献:
1.Haukanes BI, Kvam C. Biotechnology (N Y). 1993. 11(1):60-3.
2.He J, Huang M, Wang D, Zhang Z, Li G. J Pharm Biomed Anal. 2014. 101:84-101.
相关产品:
产品编号 产品名称 包装
ST422 BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (NHS磁珠, 200nm) 5ml/50ml/200ml
ST425 BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (NHS磁珠, 500nm) 5ml/50ml/200ml
ST428 BeyoMag™ NHS Magnetic Beads (NHS磁珠, 1µm) 5ml/50ml/200ml
ST401 BeyoMag™ Carboxyl Magnetic Beads (羧基磁珠, 200nm) 5ml/50ml/200ml
ST403 BeyoMag™ Carboxyl Magnetic Beads (羧基磁珠, 500nm) 5ml/50ml/200ml
ST405 BeyoMag™ Carboxyl Magnetic Beads (羧基磁珠, 1µm) 5ml/50ml/200ml
ST412 BeyoMag™ Amine Magnetic Beads (氨基磁珠, 200nm) 5ml/50ml/200ml
ST415 BeyoMag™ Amine Magnetic Beads (氨基磁珠, 500nm) 5ml/50ml/200ml
ST418 BeyoMag™ Amine Magnetic Beads (氨基磁珠, 1µm) 5ml/50ml/200ml
ST025 BSA (Fatty Acid & IgG Free, BioPremium) 5g/20g/100g
ST825 Tween-20/吐温-20 100ml/500ml
ST853 ProClean 300(抑菌防腐剂) 50ml/250ml/1L
ST1506 2-(N-吗啉基)乙磺酸一水合物(≥99.0%, BioPlus) 25g/100g/500g
FMS012 BeyoMag™磁分离架(12孔) 1个/袋
FMS024 BeyoMag™磁分离架(24孔) 1个/袋
FMS004 BeyoMag™磁分离架(4孔, 1.5ml/2ml, 蓝) 1个/盒
FMS008 BeyoMag™磁分离架(8孔, 1.5ml/2ml, 蓝) 1个/盒
FMS016 BeyoMag™磁分离架(16孔, 1.5ml/2ml, 蓝) 1个/盒
FMS154 BeyoMag™磁分离架(4孔, 15ml, 蓝) 1个/盒
FMS504 BeyoMag™磁分离架(4孔, 50ml, 蓝) 1个/盒
FMS009 BeyoMag™磁分离架(8孔, 1.5ml/2ml, 铝合金) 1个/盒
FMS015 BeyoMag™磁分离架(16孔, 1.5ml/2ml, 铝合金) 1个/盒
FMS025 BeyoMag™磁分离架(24孔, 1.5ml/2ml, 铝合金) 1个/盒
E6673 BeyoShaker™数字式翘板摇床 1套
E6800 BeyoVortex™基础型旋转混匀仪 1套
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