化学信息：
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化学名
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1-[(4-methoxyphenyl)methyl]-3-(5-nitro-1,3-thiazol-2-yl)urea
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简称
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AR-A014418
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别名
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AR A014418, AR-AO 14418, IN1309, AR-A 014418
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中文名
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N/A
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化学式
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C12H12N4O4S
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分子量
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308.31
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CAS号
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487021-52-3
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纯度
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98%
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溶剂/溶解度
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Water<1mg/ml; DMSO62mg/ml; Ethanol<1mg/ml
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溶液配制
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5mg加入1.62ml DMSO，或者每3.08mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SF2744-10mM用DMSO配制。
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生物信息：
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产品描述
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AR-A014418是一种ATP竞争性和选择性的GSK3β抑制剂，无细胞试验中IC50和Ki为104nM和38nM，而对被测试的其他26种激酶没有显著抑制作用。
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信号通路
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PI3K/Akt/mTOR; Stem Cells & Wnt
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靶点
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GSK-3β
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－
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－
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－
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－
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IC50
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38nM(Ki)
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－
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－
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－
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－
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体外研究
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在3T3成纤维细胞中，AR-A014418抑制GSK3特定位点(丝氨酸396)τ蛋白磷酸化，其IC50是2.7μM，进而保护N2A细胞免遭抑制PI3K/PKB信号通路引起的死亡。在海马切片中，AR-A014418抑制由β样淀粉肽诱导的神经退化。在NGP细胞和SH-5Y-SY细胞中，AR-A014418抑制神经内分泌标志物，抑制神经瘤细胞的生长。
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体内研究
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在SOD1蛋白G93A突变肌萎缩性脊髓侧索硬化症的小鼠模型中，腹腔注射AR-A014418(0-4mg/kg, i.p.)能够延长症状的发生，增加肌肉活力，减慢疾病发生。此外，AR-A014418通过调节脊髓中的NMDA和代谢型受体信号通路和TNF-α和IL-1β的释放来发挥对小鼠乙酸和甲醛诱导的伤害感受的抑制作用。
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临床实验
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N/A
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特征
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细胞渗透性GSK3选择性抑制剂。
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相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
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酶活性检测实验
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方法
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竞争性实验是在干净底部的孔板中用10个不同的浓度梯度重复两次来测定的。 生物素标记的多肽biotin-AAEELDSRAGS(PO3H2)PQL以2μM的浓度加入到含有6单位的重组人GSK3(α和β等量混合)12mM MOPS，pH 7.0，0.3mM EDTA，0.01% β-mercaptoethanol，0.004% Brij 35，0.5% glycerol和0.5μg牛血清蛋白/25μl中孵育10-15分钟。在50mM Mg(Ac)2中加入0.04μCi [γ-33P]ATP和未标记的ATP，ATP的终浓度是1μM，反应体积是25ul，使反应开始进行。使用不加多肽底物作为空白对照。 室温孵育20分钟以后，用含有5mM EDTA，50μM ATP，0.1% Triton X-100，以及0.25mg链霉亲和素包被具有35pmol的结合能力的珠子来终止反应。6小时以后，用液体闪烁计数器测定放射性。用GraphPad Prism通过非线性回归来分析抑制曲线。
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细胞实验
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细胞系
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N2A细胞
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浓度
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~50μM
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处理时间
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24小时
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方法
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细胞活性通过钙黄绿素和碘化吡啶摄入来测定。活细胞具有酯酶，能够将钙黄绿素摄入和排出，产生黄绿荧光。碘化吡啶只能被死细胞摄入，产生橘红色荧光。简单的说，N2A细胞在体外培养2天，然后在AR-A014418或者载体(DMSO)存在下用50μM LY-294002处理24小时。然后，N2A细胞在2μM PI和1μM钙黄绿素-AM存在下孵育30分钟。随后培养基用包含2mM CaCl2的Hanks'缓冲盐溶液洗3次，细胞通过Zeiss Axiovert 135荧光显微镜进行观察。分析3个区域(随机挑选)至少3个不同实验中每孔的情况(大约300个细胞每个区域)。以PI染色阳性的细胞比上总的细胞的比值作为细胞死亡的百分比。在每次试验中，每次都是扣除空白对照中死亡的细胞数之后计算的。
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动物实验
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动物模型
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携带G93A突变体人类SOD1的ALS小鼠模型。
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配制
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生理盐水
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剂量
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~4毫克/千克
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给药方式
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腹腔注射
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参考文献：
1. Bhat R, et al. J Biol Chem. 2003, 278(46), 45937-45945.
2. Koh SH, et al. Exp Neurol. 2007, 205(2), 336-346.
3. Martins DF, et al. J Pain. 2011, 12(3), 315-322.
包装清单：
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产品编号
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产品名称
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包装
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SF2744-10mM
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AR-A014418 (GSK-3抑制剂)
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10mM×0.2ml
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SF2744-5mg
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AR-A014418 (GSK-3抑制剂)
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5mg
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SF2744-25mg
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AR-A014418 (GSK-3抑制剂)
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25mg
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说明书
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1份
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保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存，至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
注意事项：
本产品对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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