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核酸相关> 菌种与质粒> 原核载体
pTac-His-MBP-PreScission (原核活性蛋白高表达质粒)
产品编号: D5001-1μg
产品包装:1μg
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价格: ¥ 888.00
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
D5001-1μg pTac-His-MBP-PreScission (原核活性蛋白高表达质粒) 1μg 888.00元
D5001-100μg pTac-His-MBP-PreScission (原核活性蛋白高表达质粒) 100μg 1169.00元

pTac-His-MBP-PreScission是碧云天自行研发的一种用于在目的蛋白N端同时融合表达His标签(His tag)和MBP标签(MBP tag)的双标签,并在标签与目的蛋白之前有PreScission酶切位点的原核表达质粒。MBP标签的融合表达有利于提高目的蛋白的表达量和蛋白稳定性,促进蛋白的可溶性和正确折叠;而His标签有利于通过镍柱进行目的蛋白MBP融合蛋白的分离纯化。使用本质粒,在镍柱纯化后获得的含有His和MBP双标签的目的蛋白可以通过PreScission Protease (P2302/P2303)酶切去除His标签和MBP标签。

本质粒含有Tac启动子/lac操纵子,可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白表达。在多克隆位点根据读码框插入目的基因就可以表达N端含有His和MBP双标签的目的蛋白。

本质粒在MBP标签后含有PreScission Protease识别的八肽序列LEVLFQGP,因此在目的蛋白纯化后可以利用PreScission Protease酶切除去N端的His标签和MBP标签,在理想的情况下剩余目的蛋白的N端还会仅保留两个额外的氨基酸GP (Gly-Pro)。

可采用如BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) (P2210/P2218/P2220)/His标签蛋白纯化试剂盒(耐还原螯合型) (P2226)BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) (P2233)/His标签蛋白纯化试剂盒(耐变性剂型) (P2229S)等纯化本质粒表达的目的蛋白融合蛋白,也可以使用His-tag抗体(AH367)检测或少量分离纯化目的蛋白。

本质粒为氨苄青霉素抗性。

pTac-His-MBP-PreScission质粒(6669bp)的图谱如下:

pTac-His-MBP-PreScission质粒的主要信息如下:

Feature Nucleotide Position
LacI promoter 3-80
LacI coding sequence 81-1163
Tac promoter 1406-1434
Lac operator 1442-1458
His-tag coding sequence 1531-1560
MBP-tag coding sequence 1561-2658
PreScission Protease recognition site sequence 2671-2694
Multiple cloning sites (EcoRI -XhoI) 2696-2752
M13 forward primer (M13 fwd) 2760-2776
Ampicillin resistance ORF 3441-4301
f1 origin 4401-4856
pBR322 origin 4967-5555

pTac-His-MBP-PreScission的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D5001 pTac-His-MBP-PreScission.pdf

pTac-His-MBP-PreScission中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pTac-His-MBP-PreScission)包括:

AatII AflII AgeI AleI AscI AsiSI AvrII
BaeI BbvCI BmtI BseRI BspDI BsrGI BstBI
Bsu36I ClaI CspCI EagI EcoNI FseI MfeI
NheI NotI NruI PacI PaqCI PmeI PmlI
PshAI RsrII SbfI SexAI SfiI SgrAI SnaBI
SpeI SphI SrfI StuI XmnI ZraI

pTac-His-MBP-PreScission中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pTac-His-MBP-PreScission)包括:

Acc65I G`GTAC,C 2739 NdeI CA`TA,TG 1526
AhdI GACNN,N`NNGTC 4227 NgoMIV G`CCGG,C 4726
BamHI G`GATC,C 2733 NsiI A`TGCA,T 1528
BglII A`GATC,T 1917 PaeR7I C`TCGA,G 2751
BlpI GC`TNA,GC 2344 PciI A`CATG,T 5611
BmgBI CAC|GTC 2100 PflFI GACN`N,NGTC 5869
Bpu10I CC`TNA,GC 6506 PflMI CCAN,NNN`NTGG 10
BsiWI C`GTAC,G 1848 PluTI G,GCGC`C 1070
BsmI GAATG,CN` 2176 PspXI VC`TCGA,GB 2751
BspQI GCTCTTCN`NNN, 5728 PstI C,TGCA`G 2719
BstEII G`GTNAC,C 612 SacI G,AGCT`C 2664
BstZ17I GTA|TAC 5844 SacII CC,GC`GG 2504
DraIII CAC,NNN`GTG 4622 SalI G`TCGA,C 2707
Eco53kI GAG|CTC 2666 SapI GCTCTTCN`NNN, 5728
EcoRI G`AATT,C 2695 ScaI AGT|ACT 3747
EcoRV GAT|ATC 881 SfoI GGC|GCC 1072
HindIII A`AGCT,T 2701 SmaI CCC|GGG 2729
HpaI GTT|AAC 937 StyI C`CWWG,G 2745
KasI G`GCGC,C 1070 SwaI ATTT|AAAT 4400
KpnI G,GTAC`C 2739 TspMI C`CCGG,G 2727
MluI A`CGCG,T 431 Tth111I GACN`N,NGTC 5869
MscI TGG|CCA 6644 XbaI T`CTAG,A 2713
NaeI GCC|GGC 4728 XhoI C`TCGA,G 2751
NarI GG`CG,CC 1071 XmaI C`CCGG,G 2727
NcoI C`CATG,G 2745

pTac-His-MBP-PreScission的全序列信息:D5001 pTac-His-MBP-PreScission.txt

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
D5001-1µg pTac-His-MBP-PreScission 1µg
D5001-100µg pTac-His-MBP-PreScission 100µg
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存。

注意事项:

本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.首次使用1µg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2.100µg包装的本产品可以直接用于酶切等后续用途。
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