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细胞相关> 细胞组织染色> 普通染色
成骨细胞矿化结节染色试剂盒(茜素红S法)
产品编号: C0148S
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价格: ¥ 163.00
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C0148S 成骨细胞矿化结节染色试剂盒(茜素红S法) 50次 163.00元

碧云天生产的成骨细胞矿化结节染色试剂盒(茜素红S法) (Alizarin Red S Staining Kit for Osteogenesis),也称成骨检测试剂盒(Osteogenesis Assay Kit),是一种基于茜素红S螯合钙离子(Ca2+)生成橙红色复合物,以检测成骨细胞矿化结节的染色试剂盒。

人体和动物的骨组织在生命过程中不断地进行着重建,骨重建过程包括骨的分解吸收与新骨的形成。破骨细胞(osteoclasts)负责骨分解与吸收,而成骨细胞(osteoblasts, OB)是骨形成的主要功能细胞,负责新骨形成。在成骨分化过程中,其基本的生物学特征是骨基质合成、分泌、矿化及成熟。成骨细胞首先合成I型胶原(collagen-I, COL-I)、骨钙素(osteocalcin, OC)、骨桥蛋白(osteopontin, OPN)等胞外基质,并通过基质小泡释放钙离子和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)等酶类物质,钙离子在碱性磷酸酶作用下沉淀在胶原纤维丝上,完成基质矿化过程,最终形成骨组织。I型胶原从增殖期开始表达,基质合成期达巅峰;碱性磷酸酶是成骨细胞分化的早期标志物,骨基质合成期开始出现,矿化期达巅峰;骨钙素是成骨细胞分化成熟的标志,一般矿化早期开始表达,矿化结节成熟后达巅峰。矿化结节是成骨细胞分化成熟的标志,同时也是成骨细胞行使成骨功能的主要形态学特征,观察成骨细胞的矿化结节是研究成骨细胞分化的常用技术方法之一。

茜素红S染色是一种常用的染色方法,广泛用于成骨细胞分化、骨细胞或组织病理生理的研究。茜素红S (Alizarin Red S, 简称ARS),别名茜素磺酸钠、茜素胭脂红,CAS号为130-22-3,分子式为C14H7NaO7S,分子量为342.25。茜素红S是一种蒽醌类衍生物,能和多种金属离子螯合生成稳定的橙红色或深红色的复合物,是一种良好的金属指示剂,也可作为吸光度法测定金属离子的显色剂,还可作为酸碱指示剂,或用于极谱法测定金属离子。在组织学和组织病理学中,由于茜素红S可与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物,而常用于染色或定位组织中的钙质沉积。

本试剂盒中茜素红S染色液的茜素红S浓度经过优化,呈酸性,可以通过螯合成骨细胞矿化结节中的钙离子,以判断成骨细胞的分化情况。针对不同样品的特点,碧云天研发了三种茜素红S染色液,具体请参考下表选择合适的染色液。

产品名称 茜素红S染色液(2%, pH4.2) 茜素红S染色液(0.2%, pH8.3) 成骨细胞矿化结节染色液(茜素红S法)
产品编号 C0138 C0140 C0148
产品属性 酸性 碱性 酸性
产品浓度 2% 0.2% -
染色效果 橙红色 紫红色-橙红色 橙红色
适用范围 用于骨、软骨等细胞外基质钙质沉积的染色 细胞内钙质沉积的染色 成骨细胞矿化结节中的钙质染色
特点 可快速染色;具有较好的染色效果 碱性,不易使钙质溶解;可通过增加染色时间增强染色效果 成骨细胞专用

本产品用于MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨细胞前体细胞)诱导分化的染色效果参考图1。

图1. 成骨细胞矿化结节染色试剂盒(茜素红S法)用于MC3T3-E1细胞诱导分化后的染色效果图。如图所示,经本试剂盒染色后,MC3T3-E1细胞矿化结节钙盐沉积处显橙红色。实际染色效果会因样品及实验条件的不同而存在差异,本图仅供参考。

按照6孔板每孔使用1ml固定液和1ml茜素红S染色液来计算,C0148S可以检测50个样品。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
C0148S-1 固定液(首次使用时加入40ml无水乙醇) 10ml
C0148S-2 茜素红S染色液 50ml
说明书 1份
保存条件:

室温避光保存,至少一年有效。

注意事项:

首次使用固定液时,须特别注意加入40ml无水乙醇并混匀。由于固定液易挥发,使用完毕后请立即旋紧瓶盖。

茜素红S染色液的染色的最佳时间与样品钙离子的含量有关,一般情况下染色时间为30分钟,可根据实际染色效果酌情增加或减少染色时间。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.试剂盒的准备:
首次使用时,请在固定液中加入40ml的无水乙醇,并充分混匀后备用。固定液加入无水乙醇配制完毕后,室温避光保存,至少一年有效。
2.样品处理。
a.细胞诱导分化之后,去除培养液,用PBS (C0221A)洗涤1次。
b.固定液固定20分钟。
c.PBS洗涤3次。
3.茜素红S染色液染色。
a.加入适量茜素红S染色液,均匀覆盖细胞即可,室温染色30分钟。注:请根据实际染色效果调整染色时间。
b.蒸馏水充分洗涤,随后即可在显微镜下观察和拍照。
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