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抗体> 凋亡与自噬> Autophagy Signaling
LC3B抗体(兔多抗)
产品编号: AL221
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价格: ¥ 1068.00
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AL221 LC3B抗体(兔多抗) >20次 1068.00元
来源 用途 交叉反应性 LC3B分子量
Rabbit WB, IF-IC, F H, M, R, (Mk, C, B, X) 14, 16kD

      WB, Western blot; IF-IC, Immunofluorescence-Immunocytochemistry; F, Flow cytometry.
      H, human; M, mouse; R, rat; Mk, monkey; C, chicken; B, bovine; X, Xenopus.
      本LC3B抗体(LC3B antibody)为进口分装,用人工合成的LC3B氨基端的一段多肽进行适当修饰后免疫rabbit,然后用
protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。
      本LC3B抗体识别的是总LC3B(total LC3B),可以检测内源性的LC3B,可以同时识别LC3B-I和LC3B-II,分子量依次分别为16kD和14kD。
      自噬(Autophagy)是一种最终通过溶酶体(lysosome)降解部分细胞自身组份的的分解代谢过程。自噬通常会在营养缺乏的情况下被激活,同时又与许多生理病理过程相关,包括生长、分化、神经退行性疾病、感染和肿瘤等。LC3(light chain 3)是目前公认的自噬分子标记物(autophagy marker)。LC3最初发现时被认为是微管关联蛋白1A和1B(microtubule-associated proteins 1A and 1B),被称为MAP1LC3,随后发现LC3与酵母蛋白Apg8/Aut7/Atg8具有较高相似性,并在自噬过程中起重要作用。哺乳动物中有三种LC3,包括LC3A、LC3B和LC3C,它们在自噬过程中存在相关的翻译后修饰。LC3蛋白首先会在合成后立即在其羧基端被Atg4所剪切,产生细胞浆定位的LC3-I。在自噬过程中,LC3-I会被包括Atg7和Atg3在内的泛素样体系所修饰和加工,产生分子量为14kD的LC3-II,并定位到自噬小体中。这样,自噬小体中存在的LC3,和低分子量的LC3-II都被当做细胞发生自噬的分子标志(autophagy marker),并且LC3-II的含量和发生自噬的程度成正比。LC3B作为LC3的一种,同样可以用作自噬的分子标志。
      配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测时的一抗稀释。
      建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):

WB IF-IC F
1:1000 1:400 1:50

      本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
AL221-1 LC3B抗体(兔多抗) 20μl
AL221-2 Western一抗稀释液 20ml
说明书 1份

保存条件:
      LC3B抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
      对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
      在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
      回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. Western检测:
A. 按照1:1000用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
B. 把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
C. 回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
D. 按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页:
http://www.beyotime.com/support/western.htm
2. 免疫染色:
可以使用碧云天生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体,使用后注意回收稀释好的一抗,具体操作可以参考如下网页: http://www.beyotime.com/support/immunol-staining.htm
3. 其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。
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