碧云天线粒体超氧化物检测试剂盒(MitoSOX Red) (S0061)检测L929细胞(小鼠成纤维细胞)线粒体内超氧化物的效果图:
正常的L929细胞中未氧化MitoSOX Red,观察不到红色荧光;细胞经过诱导线粒体内超氧化物生成的阳性对照试剂mSoxUp处理后,线粒体内超氧化物生成增加,MitoSOX Red与超氧化物反应并重新分布,呈现红色荧光;细胞核被Hoechst 33342所标记,呈现蓝色荧光;线粒体被Mito-Tracker Green标记,呈现绿色荧光。
超氧化物通常指超氧化物阴离子(Superoxide anion) ,是一种氧分子的自由基。在呼吸链中,NADPH氧化酶把电子传递给氧分子的时候,就会产生超氧化物阴离子O2•-。而线粒体是进行氧化代谢的重要场所。大部分的O2•-由线粒体产生,也可以由被刺激的白细胞等产生。超氧化物阴离子O2•-可以抵御微生物的感染等,但也可以导致氧化损伤,和许多疾病的发生密切相关。
碧云天生产的线粒体超氧化物检测试剂盒(MitoSOX Red)是一种以MitoSOX Red为荧光探针,快速灵敏地检测线粒体内超氧化物变化的试剂盒。本试剂盒可使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪等荧光检测系统进行检测。
产品原理
MitoSOX Red的磷酸基团上的正电荷被三个亲脂苯基包围,从而有助于其进入活细胞并选择性地靶向进入线粒体,最终可以被超氧化物氧化。被氧化的MitoSOX Red与线粒体内核酸结合,产生强烈的红色荧光,激发波长为510nm,发射波长为580nm。
图1. 碧云天线粒体超氧化物检测试剂盒(MitoSOX Red) (S0061)检测原理图。
产品特点:
● 灵敏度高:本试剂盒提供的MitoSOX Red为5mM储存液,使用浓度通常仅需1-5μM,最优先的推荐终浓度为5μM,该浓度经过优化,对大多数细胞都适用。但为了得到更满意的结果,对于不同类型的细胞需要进行一定摸索;
● 特异性强:MitoSOX Red只染活细胞,可选择性的进入线粒体,从而只检测线粒体中的O2•-;
● 检测速度快:加入MitoSOX Red染色工作液后,只需要在细胞培养箱中37℃孵育10-30分钟,即可进行检测。不同的细胞最佳孵育时间不同,可对孵育时间进行适当优化以得到最佳的效果;
● 适用广泛:该探针对悬浮培养细胞和贴壁细胞均可以进行检测,孵育结束后,经过PBS洗涤即可使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪等荧光检测系统进行检测。
● 高效阳性对照:本试剂盒提供高效的mSoxUp作为诱导细胞线粒体内超氧化物生成的阳性对照,终浓度通常为0.5-2X,最优先的推荐终浓度为1X。
注意事项
1.BSA和酚红(Phenol red)对本荧光探针的检测有干扰,需避免;
2.本试剂盒仅限于进行存活的细胞或组织的检测,不可用于固定或冻存的细胞或组织样品的检测;
3.避免反复冻融,第一次使用时建议分装成小包装后-20℃保存;
4.配制MitoSOX Red染色工作液时注意避光,且须现配现用,稀释后不能长期保存。
产品信息:
产品编号 | 产品名称 | 包装 | 产品价格 |
S0061S | 线粒体超氧化物检测试剂盒(MitoSOX Red) | 20-200次 | |
S0061M | 线粒体超氧化物检测试剂盒(MitoSOX Red) | 100-1000次 |
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