外泌体(Exosome)是膜包裹的细胞外囊泡(Extracellular vesicles, EVs)，直径约为40-160nm，具有脂质双分子层结构，天然存在于血液、尿液、脑脊液，以及体外培养细胞的上清液中[1]，几乎所有类型的细胞都可以产生并释放外泌体[2]。外泌体可以被附近或远距离的细胞识别和融合，是细胞间进行相互调控的重要媒介，参与了癌症、神经退行性病变和炎症性疾病等多种疾病的发病过程，影响细胞多方面的功能[3-4]。
外泌体的形成
细胞膜内吞(Endocytosis)依次形成初级内体(Early sorting endosome, ESE)、次级内体(Late sorting endosome, LSE)和多囊泡体(Multivesicular body, MVB)，其中多囊泡体包含腔内囊泡(Intraluminal vesicles, ILVs)，而多囊泡体与细胞膜融合形成外泌体。外泌体携带多种来自其母体细胞的成分(包括核酸、蛋白质、脂类、糖类和代谢物等)释放到胞外基质中[5]，如图1。
图1. 外泌体的形成原理及其携带的母体细胞成分示意图。
外泌体的提取
常规的细胞外囊泡提取方法有超速离心法(Ultracentrifugation/UC)、沉淀法(Precipitation)、尺寸排阻色谱法(Size-exclusion chromatography/SEC)、超滤法(Ultrafiltration/UF)、免疫亲和分离法(Immunoaffinity capture/IAC)等，而大部分商品化的试剂盒都是基于聚合物沉淀法。
聚合物沉淀法是通过聚合物阻断外泌体周围的水分子，减小外泌体的可溶性，从而使外泌体可以通过离心沉淀分离。目前，常用的聚合物有聚乙二醇（PEG）、凝集素、鱼精蛋白和乙酸钠等。
聚合物沉淀法不需要精密的仪器设备、具有方法简单、可操作性强，产量高等优点，可用于大量提取外泌体。基于聚合物沉淀法，碧云天全新推出细胞上清外泌体提取试剂盒(沉淀法)。
产品特点
✔ 仅需简单的较低速度离心即可获得大量完整的、纯度较高的外泌体；
✔ 提取得到的外泌体可以用于RNA、DNA、高通量测序及蛋白的各种应用；
✔ 可用于纳米颗粒示踪分析(NTA)、电镜分析、细胞共培养等实验；
✔ 设备要求低、操作方便、提取时间短、提取效率高；
✔ 提取样品起始量低、外泌体形态完整。
产品效果
图2. 细胞上清外泌体提取试剂盒(沉淀法) (C3620)提取的外泌体经Western blot验证的效果图。
产品信息
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| C3620S | 细胞上清外泌体提取试剂盒(沉淀法) | 50次 |
| C3620M | 细胞上清外泌体提取试剂盒(沉淀法) | 250次 |
参考文献：
[1]. Metzelaar MJ, Wijngaard PL, Peters PJ, Sixma JJ, Nieuwenhuis HK, et al. J Biol Chem. 1991. 15;266(5):3239-45.
[2]. Luo W, Dai Y, Chen Z, Yue X, Andrade-Powell KC, et al. Commun Biol. 2020. 10;3(1):114.
[3]. He C, Zheng S, Luo Y, Wang B. Theranostics. 2018. 1;8(1):237-255.
[4]. Zhang Y, Bi J, Huang J, Tang Y, Du S, et al. Int J Nanomedicine. 2020. 22;15:6917-6934.
[5]. Kalluri R, LeBleu VS. Science. 2020. 367(6478).
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