“要开组会啦！”
“老师.......我载体还没构建好......”
上面的场景是不是很熟悉？
众所周知，传统的T4DNA连接酶往往需要几个小时甚至过夜连接，那么，今天小编带着经过改造的超快速DNA连接试剂盒和夏日福利（文末福利）来啦！全程仅需0-1分钟！是的，你没看错，就是这么快！先看效果：

图1. 碧云天超快速DNA连接试剂盒(D7001)用于平末端DNA连接的效果图。本试剂盒用于平末端片段插入到载体的连接，随后转化涂板的效果见图A。在20µl反应体系中，将SmaI单酶切线性化并用D7028 Antarctic Phosphatase (Thermosensitive)去除末端磷酸根的载体pUC18与PCR扩增的1100bp双平端DNA片段混合(载体与DNA片段的摩尔比为1:3)，然后加入4µl的5X Instant Ligation Buffer，1µl Instant T4 DNA Ligase，并用水补足至20µl，室温反应0min、1min、5min、60min。然后取10µl转化到100µl的DH5α感受态细胞中，随后涂板。如图所示，连接0、1、5或60min后转化后得到的克隆数相近。菌落PCR鉴定使用本试剂盒连接获得的克隆效果见图B。如图所示，0min连接阳性率可达100%，连接时间越长，阳性率略有减少趋势，连接60min后，阳性率达60%。实际检测效果会因实验条件的不同而存在差异，图中效果仅供参考。

产品信息
超快速DNA连接试剂盒(Instant DNA Ligation Kit)(D7001)，也被称为瞬时DNA连接试剂盒或即时DNA连接试剂盒，是碧云天研发的一种把粘末端或平末端DNA片段在室温(20-25℃)短至0-1分钟内快速插入到载体(Vector)中的连接试剂盒。同时本试剂盒也可以用于其它各种常规的双链DNA连接反应。
为了获得快速高效的连接效果，本试剂盒采用了一种特殊的高活力Instant T4 DNA Ligase（D7009）以及相应的Instant Ligation Buffer。通常连接0-1分钟和连接60min的效果相近。

产品特点
省时高效：通常连接0-1分钟和连接60分钟的效果相近，阳性率明显优于传统T4 DNA连接酶（如图二）。
性价比高：价格优于国内外同类产品，且连接效率高！
适用范围广：本试剂盒可以用于PCR片段和载体的连接、酶切产物和载体的连接、linker和载体的连接、linker和linker的连接等各种双链DNA的连接。

图2. 碧云天Instant T4 DNA Ligase (D7009)和T4 DNA Ligase (D7006/D7008)的平末端连接实测效果图。如图所示，左侧为将Instant T4 DNA Ligase和T4 DNA Ligase分别用于平端连接后转化DH5α感受态细胞后涂板获得的LB平板的实测效果图，右侧为菌落PCR鉴定的结果。在20µl反应体系中，将SmaI单酶切线性化并用D7028 Antarctic Phosphatase (Thermosensitive)去除末端磷酸根的载体pUC18，与PCR扩增的1100bp双平端DNA片段混合(载体与DNA片段的摩尔比为1:3)，然后加入2µl的10X Ligation Buffer, 0.5µl的Instant T4 DNA Ligase或T4 DNA Ligase，并用水补足至20µl，分别在16℃孵育1h后，取10µl转化到100µl的DH5α感受态细胞中。实验结果表明，Instant T4 DNA Ligase连接1小时得到的克隆数相当，Instant T4 DNA Ligase连接1h的阳性率可达100%，而T4 DNA Ligase连接1h的阳性率约为60%。菌落PCR引物为M13 forward sequencing primer (5'-GTAAAACGACGGCCAGT-3')和M13 reverse sequencing primer (5'-CAGGAAACAGCTATGAC-3')。实际检测效果会因实验条件的不同而存在差异，图中效果仅供参考。

产品信息

产品编号	产品名称	产品包装	产品价格
D7001S	超快速DNA连接试剂盒	100次
D7001M	超快速DNA连接试剂盒	500次
D7009S	Instant T4 DNA Ligase	40kU
D7009M	Instant T4 DNA Ligase	200kU