给RNA加个小尾巴?您可能需要它!
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“mRNA疫苗”“重组腺病毒疫苗”“灭活疫苗”•••••新冠疫情的阴影之下,“疫苗”一词高频不断。
相比传统疫苗,mRNA疫苗生产工艺简单、开发速度快、无需细胞培养、成本低。而mRNA疫苗成功的关键之一在于mRNA的稳定性,而mRNA的稳定性又受到帽子结构和Poly A尾巴的影响。碧云天重磅推出E.coli Poly(A) Polymerase及Poly(A)聚合酶加尾试剂盒,为RNA加上小尾巴,可有效提高mRNA的稳定性!


E.coli Poly(A) Polymerase

Poly(A) Polymerase Tailing Kit

E.coli Poly(A) Polymerase
Poly(A) Polymerase Tailing Kit
碧云天生产的E.coli Poly(A) Polymerase,即E.coli Poly(A)聚合酶,也称E.coli PAP、PAP酶、Poly(A)加尾酶或PolyA加尾酶,该酶能以各种单链RNA作为底物RNA,以不依赖于模板的方式催化由ATP转化成的AMP添加到单链RNA的3’末端形成Poly(A)尾。基于E.coli Poly(A) Polymerase活性,碧云天特别研发了Poly(A) Polymerase Tailing Kit,即Poly(A)聚合酶加尾试剂盒,试剂盒提供了加尾所需的各种试剂,方便快捷,主要用于在RNA分子3'末端添加≥150个碱基的Poly(A)尾。

产品用途:
为RNA添加Poly(A)尾,用于反转录后克隆或亲和纯化;
增加mRNA的稳定性,从而提高转染至真核细胞中的RNA的翻译效率;
用放射性同位素标记的ATP或虫草素(cordycepin)标记RNA,用于RNA的末端标记或mRNA的定量;
在合成cDNA第一链时,提供引物结合位点。

产品效果:

图1. 碧云天生产的E.coli Poly(A) Polymerase与同类产品(Competitor)对单链RNA加Poly(A)尾的对比效果图。在20µl反应体系(50mM Tris-HCl, pH8.1, 250mM NaCl, 1mM ATP, 10mM MgCl2)中,加入人工合成的0.5µg 22nt的单链RNA,以及图中指定量的本产品或N公司(Competitor)的E.coli Poly(A) Polymerase,37℃孵育30min,65℃孵育20min终止反应。取出5μl反应后的产物,加入1μl 6X DNA Loading Buffer (D0071),95℃变性3min,然后进行含7M Urea的15%聚丙烯酰胺凝胶电泳。室温条件下用1X TBE作为电泳液,180V电泳90min,NA-Red (D0128) 1:1000稀释后室温染色30min,然后拍照观察。如图所示,本产品与N公司的产品相比,具有类似的对单链RNA加Poly(A)尾的效果。

图2. 碧云天Poly(A) Polymerase Tailing Kit对单链RNA添加Poly(A)尾的效果图。在100µl反应体系(50mM Tris-HCl, pH8.1, 250mM NaCl, 1mM ATP, 10mM MgCl2)中,加入人工合成的1µg 22nt的单链RNA,以及图中指定量的Poly(A) Polymerase,37℃孵育60min,65℃孵育20min终止反应。取20μl反应后的产物,加入4μl 6X DNA Loading Buffer (D0071),95℃变性3min。随后进行含7M Urea的15%聚丙烯酰胺凝胶电泳。室温条件下用1X TBE作为电泳液,180V电泳90min,NA-Red (D0128) 1:1000稀释后室温染色15min,然后拍照观察。

产品信息:

产品编号 产品名称 包装 产品价格
R7070S E.coli Poly(A) Polymerase 100U
R7070M E.coli Poly(A) Polymerase 500U
R7070L E.coli Poly(A) Polymerase 2.5kU
R7070XL E.coli Poly(A) Polymerase 10kU
R7075S Poly(A) Polymerase Tailing Kit 50-250次