了解我们的小伙伴肯定都知道，碧云天在细胞转染方面有多款品质优良，价格实惠的试剂盒产品，如今，这一家族又有新成员要和大家见面啦！
没错，就是它！碧云天植物原生质体转染试剂盒

植物原生质体通常是指植物细胞去除细胞壁后，由质膜所包围的部分细胞物质。由于其拥有无细胞壁的物理障碍、具有全能性、组织培养可进行大量繁殖等特点，原生质体是开展一系列植物细胞研究的重要材料。

碧云天生产的C0563 植物原生质体转染试剂盒，可以将质粒、Cas9/sgRNA等蛋白和RNA转染进入植物原生质体内。经转染的植物原生质体经过一段时间的培养后，可用于检测外源基因的表达和功能、也可以观测到目的基因的表达调控。
以拟南芥原生质体为例，使用本试剂盒转染质粒后，通常2-6小时就可以检测到相关基因的转录变化；2-16小时后可以检测到相关蛋白表达的变化；24小时后则可以检测到基因编辑情况。

转染原理：
本试剂盒采用优化后的聚乙二醇转染方法，借助聚乙二醇短时间内对原生质体产生的冲击效应，使质粒DNA、RNA或蛋白能够进入原生质体，不仅使用起来十分便捷，同时还具有超高的转染效率！

转染效果：
为了能够让大家更加清楚直观地看到这款新品的使用效果，我们也帮大家提前做了测试。
采用本试剂盒将植物EGFP表达质粒转染拟南芥原生质体的效果如下图：

图1. 使用碧云天植物原生质体转染试剂盒(Plant Protoplasts Transfection Kit)转染拟南芥原生质体的效果图。在2ml的圆底离心管(FTUB019)中加入20μg p35SPPDK-EGFP-Flag (植物用绿色荧光蛋白) (D2627)，加入100μl制备好的原生质体，轻柔混匀后加入110μl当日配制好的转染试剂溶液，轻柔混匀，室温静置5min后加入440μl终止液，轻轻颠倒混匀，室温100g离心1min，去除上清，再加入0.5ml终止液，轻柔重悬原生质体，室温100g离心1min后，尽量去除上清，收集原生质体。加入1ml培养液，小心重悬原生质体后将其平置25℃培养过夜(约16h)，次日于荧光显微镜下检测EGFP荧光信号。上图为实际检测的明场（A）和荧光照片（B）。
图中可以清楚地看到，绝大部分原生质体都成功转进了EGFP表达质粒，并实现了绿色荧光蛋白的表达。

当然，巧妇难为无米之炊，转染试剂都准备好了，没有原生质体怎么能行！
小编也为您准备好了碧云天C0362 植物原生质体分离试剂盒，可以帮助您轻松获取原生质体，二者搭配使用，更加方便快捷！

C0362 植物原生质体分离试剂盒能够利用酶学方法消化植物细胞壁中的纤维素从而释放出大量且具有生物活性的原生质体，使用起来简单、快捷。分离得到的原生质体可以用于质粒DNA的转染以及原生质体融合等实验研究。

图2.碧云天生产的植物原生质体分离试剂盒(Plant Protoplasts Isolation Kit)分离制备的拟南芥原生质体效果图。生长状态良好的拟南芥叶片20片，去除叶片的尖端与基部，用刀片(FS205)切成0.5-1mm小条，浸入配制的细胞壁消化液中，真空干燥器抽真空30min，避光条件下消化3h后，轻轻摇动并吸取少量消化液在光学显微镜下观察游离的原生质体(图A)。消化比较充分后，将所得原生质体溶液用1X Dilution Buffer进行等体积稀释，再用70μm孔径的细胞过滤器(FSTR070)过滤所获得的原生质体溶液，以去除未消化完全的叶片，室温下100g离心1min，去除上清，将其重悬于500μl Resuspension Buffer中，吸取100μl重悬的原生质体，光学显微镜下观察原生质体的数量与形态(图B)。实际的检测效果会因检测条件的不同而存在差异，本图仅供参考。

最后关于这两款试剂盒的使用注意事项，小编还要再啰嗦两句：
1. 拟南芥生长状态对原生质体的分离效率有很大影响，建议保证合适的拟南芥生长条件并选用形态及生长良好的叶片进行原生质体分离；
2. 根据不同植物以及突变体株系可适当调整酶消化时间，应保证叶片的碎条和细胞壁酶消化液充分接触；
3. 转染试剂溶液需要在转染前至少1小时配制，以确保转染试剂溶解充分；
4. 转染试剂溶液配制后尽量当天使用。配制好的转染试剂溶液室温保存5天之内仍然有较好的转染效率，但和当天配制的转染试剂溶液相比，转染效果可能会有一定程度的下降；
5. 原生质体转染对于质粒的纯度要求较高，需要尽量使用高纯度的质粒，并建议您通过预试验确定转染时不同大小的质粒用量与原生质体的最佳配比；
6. 原生质体质量对转染效果有很大影响，建议使用生长健康的植物如拟南芥的嫩绿叶片进行原生质体分离，确保原生质体质量。

订购信息:

产品编号	产品名称	包装	产品价格
C0362S	植物原生质体分离试剂盒	5mlx20次
C0563S	植物原生质体转染试剂盒	100次
C0563M	植物原生质体转染试剂盒	500次

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D2489-1µg	pRD29B-luc (植物报告基因质粒)	1µg
D2489-100µg	pRD29B-luc (植物报告基因质粒)	100µg
D2491-1µg	pUBI10-GUS (植物报告基因质粒)	1µg
D2491-100µg	pUBI10-GUS (植物报告基因质粒)	100µg
D2627-1µg	p35SPPDK-EGFP-Flag (植物用绿色荧光蛋白)	1µg
D2627-100µg	p35SPPDK-EGFP-Flag (植物用绿色荧光蛋白)	100µg
P0043-100ml	植物Western及IP细胞裂解液	100ml
P0045-100ml	植物RIPA裂解液(强)	100ml

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https://www.beyotime.com/goods.do?method=lcode&lcode=001003003001