毕赤酵母(Pichia Pastoris)是目前仅次于大肠杆菌的最常用蛋白表达系统。该系统具有真核细胞表达系统多方面的优势,包括较好的蛋白翻译后剪切、蛋白折叠以及翻译后修饰等。与昆虫细胞表达系统和哺乳动物细胞表达系统相比,毕赤酵母表达系统快速、高效且经济,通常外源蛋白还具有较高的表达水平。与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)相比,毕赤酵母的外源蛋白表达水平往往高10-100倍,并且能进行分泌蛋白的N-连接糖苷键修饰。
全面菌种库,任君DIY!
一些毕赤酵母表达载体利用强大的AOX1启动子,并使用甲醇诱导感兴趣基因的高水平表达。如果更倾向于不依赖于甲醇诱导的表达,可以使用GAPDH基因的启动子实现组成性表达。诱导型和组成型表达构建物均整合到毕赤酵母基因组中,形成稳定的宿主,产生极高的蛋白质表达水平。AOX1基因突变丧失功能时,乙醇氧化酶活性缺失,产生Methanol utilization slow (Muts)基因型,也称Methanol utilization minus (Mut-)基因型,而AOX1基因表达正常则被称为Methanol utilization plus (Mut+)基因型。
碧云天提供多种毕赤酵母甘油菌供客户选购,且均是取对数生长期的毕赤酵母菌液,加入等体积30% (v/v)甘油制备而成。可以直接进行平板划线或小量、大量培养:
产品编号 | 产品名称 | 特点 |
D0412 | 毕赤酵母GS115甘油菌 | Mut+基因型。毕赤酵母GS115的组氨醇脱氢酶基因(Histidinol dehydrogenase, his4 )发生突变,阻止其合成组氨酸,所以GS115属于组氨酸缺陷型菌株(His-);如果表达载体上携带有组氨醇脱氢酶基因,就可补偿宿主菌的组氨酸缺陷,因此可以在不含组氨酸的培养基上筛选转化子,适用于筛选带有his4基因的表达载体。 |
D0413 | 毕赤酵母KM71甘油菌 | Muts基因型。毕赤酵母KM71的组氨醇脱氢酶基因(Histidinol dehydrogenase, his4)发生突变,阻止其合成组氨酸,所以KM71属于组氨酸缺陷型菌株(His-);如果表达载体上携带有组氨醇脱氢酶基因,就可补偿宿主菌的组氨酸缺陷,因此可以在不含组氨酸的培养基上筛选转化子,适用于筛选带有his4基因的表达载体。 |
D0414 | 毕赤酵母X-33甘油菌 | Mut+基因型。毕赤酵母X-33属于野生型菌株,含有AOX1基因,产生的转化株是Mut+ (Methanol utilization plus)基因型。X-33毕赤酵母被推荐用来表达含有Zeocin抗性的载体重组质粒,在筛选X-33重组转化菌株时,Zeocin抗生素的工作浓度推荐是100μg/ml。 |
D0415 | 毕赤酵母SMD1168H甘油菌 | Mut+基因型。毕赤酵母SMD1168H基因组中的pep4基因发生突变,造成蛋白水解酶A活性的丧失,可以保护表达产物免受降解,促进表达量的提高,产生的转化株是Mut+ (Methanol utilization plus)基因型。SMD1168H毕赤酵母被推荐用来表达含有Zeocin抗性的载体重组质粒,在筛选SMD1168H重组转化菌株时,Zeocin抗生素的工作浓度推荐是100μg/ml。 |
感受态制备与转化——有它就够了!
碧云天生产的毕赤酵母感受态细胞制备及转化试剂盒,是一种快速、便捷、高效地制备毕赤酵母感受态细胞并进行质粒转化的试剂盒。进行毕赤酵母转化时,使用试剂盒中提供的缓冲溶液培养酵母细胞,使其处于待转化状态,然后将感受态细胞与待转化的质粒DNA和*Carrier DNA混合再使用转化溶液孵育进行转化。
*Carrier DNA是短的线形单链DNA,在酵母细胞摄取外源质粒DNA过程中能促进质粒进入酵母细胞,还可以保护质粒免于被DNA酶降解。
![](../html/images/newproduct-D0308_pic1.jpg)
图1.碧云天毕赤酵母感受态细胞制备及转化试剂盒(D0308)的转化效果图。
产品信息:
产品编号 | 产品名称 | 产品包装 |
D0308S | 毕赤酵母感受态细胞制备及转化试剂盒 | 50次 |
D0308M | 毕赤酵母感受态细胞制备及转化试剂盒 | 250次 |
灵活质粒搭配,轻松搞定胞内外蛋白表达!
碧云天具有pAOX1-MCS-His和pAOX1-α factor-MCS-His系列不同抗性(氨苄青霉素抗性、氨苄青霉素和博来霉素双抗性)的质粒可供大家选择,均含有醇氧化酶基因AOX1启动子,可以高效启动目的基因的表达。其中,α-factor信号肽,用于引导目的蛋白的分泌(胞外)表达。
产品信息:
产品编号 | 产品名称 | 产品包装 |
D2881-1μg | pAOX1-MCS-His-Zeocin | 1μg |
D2881-100μg | pAOX1-MCS-His-Zeocin | 100μg |
D2883-1μg | pAOX1-MCS-His-Amp&Zeo | 1μg |
D2883-100μg | pAOX1-MCS-His-Amp&Zeo | 100μg |
D2882-1μg | pAOX1-α factor-MCS-His-Zeocin | 1μg |
D2882-100μg | pAOX1-α factor-MCS-His-Zeocin | 100μg |
D2884-1μg | pAOX1-α factor-MCS-His-Amp&Zeo | 1μg |
D2884-100μg | pAOX1-α factor-MCS-His-Amp&Zeo | 100μg |
ST1450-20mg | Zeocin (博莱霉素) | 20mg |
ST1450-100mg | Zeocin (博莱霉素) | 100mg |
ST1450-0.25ml | Zeocin (博莱霉素) | 20mg/ml×0.25ml |
ST1450-1ml | Zeocin (博莱霉素) | 20mg/ml×1ml |
ST007 | Ampicillin | 5g |
ST008 | Ampicillin (100mg/ml,1000X) | 5ml |
轻松筛选鉴定——酵母菌落PCR试剂盒
酵母细胞壁独特的结构致使其DNA难以被简单的PCR加热过程所释放,导致酵母像一般细菌一样(使用超便捷的菌落直接PCR试剂盒来啦!还有试用装提供哦~)直接作为模板进行PCR检测变得困难。碧云天贴心为大家研发了碱裂解法的酵母菌落PCR试剂盒(D7278)和酶解法的酵母菌落PCR试剂盒(D7279)供大家选择。如何选择?请戳:便捷高效!酵母菌落PCR试剂盒来啦!
产品信息:
产品编号 | 产品名称 | 产品包装 |
D7278S | 酵母菌落PCR试剂盒(碱裂解法) | 100次 |
D7278M | 酵母菌落PCR试剂盒(碱裂解法) | 500次 |
D7279S | 酵母菌落PCR试剂盒(酶解法) | 100次 |
D7279M | 酵母菌落PCR试剂盒(酶解法) | 500次 |
BeyoPure系列酵母培养——为毕赤酵母生长保驾护航!
对于酵母培养基,碧云天有酵母膏蛋白胨葡萄糖培养基(预混粉末)、酵母膏蛋白胨葡萄糖琼脂培养基(预混粉末)和酵母浸出粉蛋白胨葡萄糖培养基(YPD肉汤培养基)供大家灵活选购。
产品信息:
产品编号 | 产品名称 | 产品包装 |
ST961-5L | BeyoPure™ YPD Broth (premixed powder) | 10×500ml |
ST963-5L | BeyoPure™ YPD Broth with Agar (premixed powder) | 10×500ml |
ST965-500ml | BeyoPure™ YPD Broth (YPD肉汤培养基) | 500ml |
无需酚氯仿抽提,无需酒精沉淀—酵母质粒小量抽提试剂盒
碧云天生产的酵母质粒小量提取试剂盒(Yeast Plasmid Mini Preparation Kit)是一种使用破壁酶(Lyticase)消化去除酵母细胞壁,然后采用一种新型的酵母质粒纯化柱实现从酵母细胞中进行小量质粒快速抽提的试剂盒。无需酚氯仿抽提,无需酒精沉淀,12个样品只需约1-1.5小时即可完成。
产品信息:
产品编号 | 产品名称 | 产品包装 |
D0029 | 酵母质粒小量抽提试剂盒 | 50次 |
对蛋白降解Say NO!碧云天抑制剂为您的蛋白保驾护航!
碧云天推出有仅进行蛋白酶抑制的蛋白酶抑制剂混合物(真菌或酵母抽提用, 100X)及同时抑制蛋白酶和磷酸酶的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(真菌或酵母抽提用, 50X)供大家灵活选购,轻松保护蛋白不被降解!
产品信息:
产品编号 | 产品名称 | 产品包装 |
P1020 | 蛋白酶抑制剂混合物(真菌或酵母抽提用, 100X) | 1ml |
P1020-5ml | 蛋白酶抑制剂混合物(真菌或酵母抽提用, 100X) | 5ml |
P1060 | 蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(真菌或酵母抽提用, 50X) | 各2ml |
P1061 | 蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(真菌或酵母抽提用, 50X) | 各10ml |