关于不同萤光素酶报告基因检测试剂盒的比较和选择

碧云天生产的不同萤光素酶报告基因检测试剂盒的特点和比较见下表:
产品编号 产品简称 同类产品简称 检测对象 检测方法 使用便捷性 检测灵敏度 信号强度 信号半衰期 产品稳定性 线性范围(细胞数) 推荐指数
RG051 Bright-Lumi Bright-Glo 萤火虫萤光素酶 一步法直接检测 非常便捷 特别灵敏 特别高 0.5-1小时 较稳定(冻融10次保留90%,室温3天保留55%) 50-10万个 ★★★★★
RG055 One-Lumi One-Glo 萤火虫萤光素酶 一步法直接检测 非常便捷 非常灵敏 非常高 1-2小时 较稳定(冻融10次保留90%,室温3天保留60%) 50-10万个 ★★★★
RG058 Steady-Lumi Steady-Glo 萤火虫萤光素酶 一步法直接检测 非常便捷 较灵敏 较高 5-6小时 较稳定(冻融10次保留85%,室温3天保留50%) 50-20万个 ★★★★
RG062 Renilla-Lumi Renilla-Glo 海肾萤光素酶 一步法直接检测 非常便捷 较灵敏 较高 1-2小时 非常稳定(冻融10次无影响,室温3天保留80%) 50-10万个 ★★★★★
RG066 Renilla-Lumi Plus Renilla-Glo 海肾萤光素酶 一步法直接检测 非常便捷 非常灵敏 非常高 15分钟 特别稳定(冻融10次或室温3天,无显著影响) 50-10万个 ★★★★★
RG088 Dual-Lumi Dual-Glo 双萤光素酶 双荧光素酶均一步法直接检测 非常便捷 非常灵敏 非常高 1-2小时 较稳定(冻融10次保留95%、90%,室温3天保留50%、95%) 50-10万个 ★★★★★
RG005/RG006 萤火虫萤光素酶检测试剂盒 Luciferase Assay System 萤火虫萤光素酶 两步法收集细胞后检测 较便捷 非常灵敏 非常高 约40分钟 较稳定 - ★★★★
RG007 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II Luciferase Assay System 萤火虫萤光素酶 两步法收集细胞后检测 较便捷 非常灵敏 非常高 约40分钟 特别稳定 - ★★★★
RG009 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) Luciferase Assay System 萤火虫萤光素酶 两步法收集细胞后检测 较便捷 特别灵敏 特别高 约10分钟 较稳定 - ★★★★
RG010 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) Luciferase Assay System 萤火虫萤光素酶 两步法收集细胞后检测 较便捷 特别灵敏 特别高 约10分钟 特别稳定 - ★★★★
RG016/RG017  海肾萤光素酶检测试剂盒 Renilla luciferase assay system 海肾萤光素酶 两步法收集细胞后检测 较便捷 特别灵敏 特别高 2-5分钟 较稳定 - ★★★★
RG027/RG028 双萤光素酶检测试剂盒 Dual luciferase reporter assay system 双萤光素酶 两步法收集细胞后检测 较便捷 特别灵敏(Firefly) 非常灵敏(Renilla) 特别高(Firefly) 非常高(Renilla) 约15分钟(Firefly) 200秒(Renilla) 较稳定 - ★★★★
RG029 双萤光素酶报告基因检测试剂盒II Dual luciferase reporter assay system 双萤光素酶 两步法收集细胞后检测 较便捷 特别灵敏(Firefly) 非常灵敏(Renilla) 特别高(Firefly) 非常高(Renilla) 约15分钟(Firefly) 200秒(Renilla) 特别稳定 - ★★★★
不同报告基因检测试剂盒的选择:

1. 对于96孔板、384孔板中细胞内萤光素酶活性测定或高通量检测时,推荐使用Bright-Lumi (RG051)One-Lumi (RG055)Steady-Lumi (RG058)Renilla-Lumi (RG062)Renilla-Lumi Plus (RG066)Dual-Lumi (RG088)这六款一步法直接检测试剂盒。与萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006)萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (RG007)萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) (RG009)萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) (RG010)海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG016)双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)双萤光素酶报告基因检测试剂盒II (RG029)这七款收集细胞后检测的两步法试剂盒相比,一步法更加简单快捷,细胞可以在同一块多孔板中培养和检测,无需洗涤细胞,无需更换或去除培养液,也无需裂解和收集细胞,只需把试剂盒中对应的萤光素酶检测试剂与培养细胞等体积混合,反应数分钟后即可进行化学发光检测。两步法检测试剂盒,需要先裂解并收集细胞或组织样品,然后再进行测定。
2. 对于使用培养皿、6孔板等细胞样品比较多的情况下,推荐使用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006)萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (RG007)萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) (RG009)萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) (RG010)海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG016)双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)双萤光素酶报告基因检测试剂盒II (RG029)这七款两步法检测试剂盒。先使用此类试剂盒配套的报告基因检测裂解液裂解并收集细胞样品,样品的用量可以根据细胞内萤光素酶的表达水平在20-100微升范围内进行适当调整,而且制备的样品如果不能立即检测,也可以先冻存待后续检测。同时,裂解的细胞样品也可以用于Western检测等。裂解后的样品也可以使用Bright-Lumi (RG051)One-Lumi (RG055)Steady-Lumi (RG058)Renilla-Lumi (RG062)Renilla-Lumi Plus (RG066)Dual-Lumi (RG088)这六款一步法直接检测试剂盒进行检测的,此时检测试剂的推荐用量为100μl,推荐的样品体积为20μl。
3. 萤光素酶报告基因检测试剂盒系列7类产品中,萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006)萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) (RG009)海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG016)双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)为即用型液体包装版本,萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (RG007)萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) (RG010)双萤光素酶报告基因检测试剂盒II (RG029)为冻干粉包装版本。即用型液体包装版本和对应的冻干粉包装版本相比,两者的区别主要在于使用便捷性和保存稳定性。即用型液体包装,优点是无需配制即可以直接使用,缺点是长期保存需要置于-80℃,如果在-20℃保存时间较长后检测效果会逐渐下降;冻干粉包装,使用前需要使用提供的缓冲液充分溶解底物冻干粉后才能使用,优点是在-20℃保存非常稳定。
4. 对于一步法萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒,如果希望发光信号比较强,并在30分钟内即可进行检测,推荐使用Bright-Lumi;如果对信号稳定性要求特别高,需要批量或连续操作,推荐使用Steady-Lumi;如果对发光信号和稳定性都有要求,推荐使用信号强度和稳定性都比较折中的One-Lumi。对于常规的实验室检测,优先推荐使用Bright-Lumi。
5. 对于一步法海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒,如果样品中萤光素酶活性比较低,希望发光信号比较强,并在10分钟内即可进行检测,推荐使用具有超高灵敏度的Renilla-Lumi Plus;如果对信号稳定性要求比较高,需要批量或连续操作,推荐使用Renilla-Lumi。