关于不同细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒的比较和选择

产品编号	产品名称	主要用途	Formazan的水溶性	检测灵敏度	检测时间	检测指标	细胞毒性	试剂稳定性	大批量样品检测	使用便捷程度	直接检测细胞增殖
C0009	MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒	细胞增殖及细胞毒性检测	差	++	较长	A560-600nm	高，细胞形态消失	+	++	+	否
C0035 C0036 C0036L	WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒	细胞增殖及细胞毒性检测	好	+++	较短	A420-480nm	低，细胞形态不变	++++	++++	+++	否
C0037 C0038 C0039 C0040	Cell Counting Kit-8	细胞增殖及细胞毒性检测	好	+++	较短	A420-480nm	低，细胞形态不变	+++++	++++	++++	否
C0041 C0042 C0043 C0046	Enhanced Cell Counting Kit-8	细胞增殖及细胞毒性检测	好	++++	较短	A420-480nm	低，细胞形态不变	+++++	++++	++++	否
C2013	Calcein AM细胞活性检测试剂盒(CCK-F)	细胞增殖及细胞毒性检测	不涉及	++++	很短	荧光	低，细胞形态不变	++++	++++	+++++	否
C0065	CellTiter-Lumi™发光法细胞活力检测试剂盒	细胞增殖及细胞毒性检测	不涉及	+++++	极短	化学发光	细胞会被裂解	++++	+++++	+++++	否
C0056	CellTiter-Lumi™ II发光法细胞活力检测试剂盒	细胞增殖及细胞毒性检测	不涉及	+++++	极短	化学发光	细胞会被裂解	+++++	+++++	++++	否
C0068	CellTiter-Lumi™ Plus发光法细胞活力检测试剂盒	细胞增殖及细胞毒性检测	不涉及	+++++	极短	化学发光	细胞会被裂解	++++	+++++	+++++	否
C0057	CellTiter-Lumi™ Plus II发光法细胞活力检测试剂盒	细胞增殖及细胞毒性检测	不涉及	+++++	极短	化学发光	细胞会被裂解	+++++	+++++	++++	否
C0069	CellTiter-Lumi™ Steady发光法细胞活力检测试剂盒	细胞增殖及细胞毒性检测	不涉及	+++++	极短	化学发光	细胞会被裂解	++++	+++++	+++++	否
C0058	CellTiter-Lumi™ Steady II发光法细胞活力检测试剂盒	细胞增殖及细胞毒性检测	不涉及	+++++	极短	化学发光	细胞会被裂解	+++++	+++++	++++	否
C0070	CellTiter-Lumi™ Steady Plus发光法细胞活力检测试剂盒	细胞增殖及细胞毒性检测	不涉及	+++++	极短	化学发光	细胞会被裂解	++++	+++++	+++++	否
C0059	CellTiter-Lumi™ Steady Plus II发光法细胞活力检测试剂盒	细胞增殖及细胞毒性检测	不涉及	+++++	极短	化学发光	细胞会被裂解	+++++	+++++	++++	否
C0071	BeyoClick™ EdU-488细胞增殖检测试剂盒	细胞增殖	不涉及	+++++	较短	绿色荧光	细胞需被固定	++++	+++	++	是
C0075	BeyoClick™ EdU-555细胞增殖检测试剂盒	细胞增殖	不涉及	+++++	较短	红色荧光	细胞需被固定	++++	+++	++	是
C0078	BeyoClick™ EdU-594细胞增殖检测试剂盒	细胞增殖	不涉及	+++++	较短	红色荧光	细胞需被固定	++++	+++	++	是
C0081	BeyoClick™ EdU-647细胞增殖检测试剂盒	细胞增殖	不涉及	+++++	较短	远红外荧光	细胞需被固定	++++	+++	++	是
C0085	BeyoClick™ EdU细胞增殖检测试剂盒(DAB法)	细胞增殖	不涉及	+++++	较短	DAB显色	细胞需被固定	++++	+++	++	是
C0088	BeyoClick™ EdU细胞增殖检测试剂盒(TMB法)	细胞增殖	不涉及	+++	较短	TMB显色	细胞需被固定	++++	+++	++	是

关于CCK-8、Enhanced CCK-8和WST-1法：

如果对细胞增殖或细胞毒性的检测要求灵敏度很高，并且希望比较便捷，在研究经费许可的条件下，建议选择使用Enhanced Cell Counting Kit-8 (C0041、C0042、C0043或C0046)。如果既希望检测灵敏度很高并且检测比较便捷，但又希望价格不是太贵，可以选择选择Cell Counting Kit-8 (C0037、C0038、C0039或C0040)，或选择WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(C0035、C0036或C0036L)。

关于Calcein AM细胞活性检测试剂盒(CCK-F)：

如果有荧光酶标仪，在研究经费许可的情况下，可以考虑选择CCK-F（C2013S、C2013M或C2013L）。CCK-F比CCK-8、Enhanced CCK-8的检测灵敏度更高，可以检测低至50个细胞，并在50-50000个细胞范围内有良好线性关系。CCK-F的检测时间也比CCK-8、Enhanced CCK-8更短，约40分钟即可完成检测。但CCK-F的检测灵敏度，和检测的快捷程度略低于CTL、CTL Plus、CTL Steady和CTL Steady Plus。CCK-F和CTL、CTL Plus、CTL Steady及CTL Steady Plus相比的优势是，在达到高灵敏度和高快捷性的情况下，不会影响细胞形态，在CCK-F检测的同时，还可以进行其它荧光探针的复染，例如 Annexin V-PE (C1065)或PI染色(ST511)检测细胞凋亡或坏死、Mito-Tracker Red CMXRos (C1049)检测线粒体活力（线粒体膜电位）、Hoechst 33342活细胞染色液(C1027-C1029)染色细胞核等，以便于进行更深入的细胞凋亡或坏死研究。

关于CTL、CTL Plus、CTL Steady和CTL Steady Plus：

如果有检测多孔板的化学发光仪器，并且对于检测的灵敏度要求特别高或者希望进行高通量检测，推荐使用CellTiter-Lumi™发光法细胞活力检测试剂盒(CTL，C0065)、CellTiter-Lumi™ II发光法细胞活力检测试剂盒(CTL II，C0056)、CellTiter-Lumi™ Plus发光法细胞活力检测试剂盒(CTL Plus，C0068)、CellTiter-Lumi™ Plus II发光法细胞活力检测试剂盒(CTL Plus II，C0057)、CellTiter-Lumi™ Steady发光法细胞活力检测试剂盒(CTL Steady, C0069)、CellTiter-Lumi™ Steady II发光法细胞活力检测试剂盒(CTL Steady II, C0058)、CellTiter-Lumi™ Steady Plus发光法细胞活力检测试剂盒(CTL Steady Plus, C0070)或CellTiter-Lumi™ Steady Plus II发光法细胞活力检测试剂盒(CTL Steady Plus II, C0059)，该系列产品已经广泛用于高通量的药物筛选等。CTL系列共8类产品，最大的优点在于检测灵敏度特别高，可以检测到低至约10个细胞，并且检测速度非常快(约十分钟就可完成一个96孔板或384孔板的检测)，特别适合用于高通量检测。CTL和CTL Plus两者相比，CTL Plus的检测上限更高，线性范围更宽，并且发光值随时间的稳定性也更高一些。经费非常充裕时推荐使用CTL Plus，但CTL在96孔板中单孔的细胞数量不超过3万时也能满足常规的高通量检测需要。CTL和CTL Steady相比，两者的检测灵敏度和检测细胞数量的上限基本一致，CTL Steady的信号强度约为CTL的50-70%，但化学发光特别稳定，在1小时内通常发光信号整体的波动范围小于±10%，对精度要求比较高的实验优先推荐使用CTL Steady。CTL Steady和CTL Steady Plus相比，两者的化学发光都很稳定，CTL Steady Plus的检测上限更高，线性范围更宽，经费非常充裕时推荐使用CTL Steady Plus，但CTL Steady在96孔板中单孔的细胞数量不超过3万时也能满足常规的高通量检测需要。CTL Steady Plus和CTL Plus相比，化学发光特别稳定，在1小时内通常发光信号整体的波动范围小于±10%，特别适合检测精度要求比较高的实验。CTL Steady Plus和CTL Plus相比，信号强度约为CTL Plus的65-85%，信号强度略有下降，检测灵敏度和检测细胞数量的上限和CTL Plus基本一致。如果实验经费比较充足，CTL系列产品中，最优先推荐使用CTL Steady Plus。CTL系列8类产品中，CTL、CTL Plus、CTL Steady和CTL Steady Plus为即用型液体包装版本，CTL II、CTL Plus II、CTL Steady II和CTL Steady Plus II为冻干粉包装版本。即用型液体包装版本和对应的冻干粉包装版本相比，两者的区别主要在于使用便捷性和保存稳定性。即用型液体包装，优点是无需配制即可以直接使用，缺点是长期保存需要置于-80℃，如果在-20℃保存时间较长后检测效果会逐渐下降；冻干粉包装，使用前需要使用提供的缓冲液充分溶解底物冻干粉后才能使用，优点是在-20℃保存非常稳定。

关于BeyoClick™系列产品：

如果需要直接检测细胞增殖，推荐使用基于BrdU掺入法的升级版本EdU掺入法的BeyoClick™系列产品(C0071、C0075、C0078、C0081、C0085和C0088)。其中C0071、C0075、C0078和C0081是荧光法，激发波长分别为488、555、594和647nm，非常适合用于直观的荧光显微镜定性检测或流式细胞仪和荧光酶标仪的定量检测，也非常适合用于高通量的高内涵筛选(High-Content Screening, HCS)。C0085是DAB显色法，可用普通显微镜进行观察和拍照；C0088是TMB显色法，可通过比色法进行定量检测。BeyoClick™系列产品不仅能用于培养细胞的增殖检测，也能用于活体组织中的细胞增殖检测。BeyoClick™系列产品用于活体组织的增殖检测时，需要预先掺入EdU。基于EdU掺入法的细胞增殖检测的效果等同于最经典的[3H]thymidine掺入方法，检测的是DNA的复制，但无需使用放射性同位素，而CCK-8、MTT等方法是比较间接的用于检测细胞增殖的方法，并且不能用于检测活体组织中细胞的增殖。

关于MTT法：

如果对细胞增殖或细胞毒性的检测要求不是很高，从经济角度可以选择MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(C0009)。该试剂盒可以满足常规的细胞增殖或细胞毒性的检测，主要缺点是形成的formazan水溶性很差，需要额外的步骤溶解formazan。另外一个缺点是MTT不太稳定，保存过程中很容易氧化变质，导致无法进行正常的检测。CCK-8、Enhanced CCK-8和WST-1法都是MTT法的升级方法。MTT法的主要优势是检测试剂盒的成本比较低。